Η βασική διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC είναι ότι η HPLC επιτρέπει την ανάλυση σωματιδίων που έχουν το μέγεθός τους περίπου 5 μικρόμετρα, ενώ το UPLC επιτρέπει πολύ μικρότερα σωματίδια περίπου 2 μικρομέτρων.
Το HPLC και UPLC είναι και οι δύο τεχνικές υγρής χρωματογραφίας που είναι χρήσιμες για τον διαχωρισμό των συστατικών μιας ένωσης. Για να γνωρίζουμε τη διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC, πρέπει πρώτα να γνωρίζουμε τι είναι το HPLC. Αυτό συμβαίνει επειδή το UPLC είναι μια ειδική έκδοση του HPLC και μπορούμε εύκολα να το καταλάβουμε αν γνωρίζουμε τι είναι το HPLC.
Τι είναι το HPLC;
Ο όρος HPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης. Είναι μια τεχνική που μπορούμε να χρησιμοποιήσουμε για να διαχωρίσουμε διαφορετικά συστατικά μιας ένωσης. Επίσης, είναι η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική για τον προσδιορισμό, τον ποσοτικό προσδιορισμό και τον διαχωρισμό των συστατικών ενός μείγματος. Επιπλέον, αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί υψηλή πίεση για να ωθήσει τους διαλύτες μέσα από τη στήλη. Επιπλέον, οι κύριες εφαρμογές της HPLC είναι στη βιοχημεία για την ανάλυση των συστατικών μιας ένωσης. Είναι ένας ιδανικός τρόπος για τον διαχωρισμό και την ταυτοποίηση αμινοξέων, νουκλεϊκών οξέων, πρωτεϊνών, υδρογονανθράκων, φυτοφαρμάκων, υδατανθράκων, αντιβιοτικών, στεροειδών και αμέτρητων άλλων ανόργανων ουσιών.
Εικόνα 01: Σύστημα HPLC σε ένα εργαστήριο
Συνοπτικά, η μέθοδος λειτουργίας της τεχνικής HPLC είναι η εξής. Πρώτον, θα πρέπει να εισάγουμε το δείγμα στο ρεύμα της κινητής φάσης σε διακριτές μικρές ποσότητες χρησιμοποιώντας μια αντλία. Η πίεση της αντλίας πρέπει να διατηρείται στα 40 MPa. Στη συνέχεια, αυτό το ρεύμα κινητής φάσης διεισδύει μέσω της στήλης HPLC. Επίσης, τα συστατικά του δείγματος διέρχονται από τη στήλη. Ωστόσο, οι ταχύτητες κίνησής τους είναι διαφορετικές μεταξύ τους. Αυτή η διαφορά προκύπτει λόγω της διαφοράς στις αλληλεπιδράσεις μεταξύ των συστατικών του δείγματος και του προσροφητικού μέσα στη στήλη. Ονομάζουμε αυτό το προσροφητικό ως ακίνητη φάση επειδή βρίσκεται μέσα στη στήλη (δεν κινείται). Δεύτερον, στο τέλος της στήλης, μπορούμε να συλλέξουμε το δείγμα που εκλούεται από τη στήλη. Εκεί μπορούμε να προσδιορίσουμε τις διαφορές στους χρόνους διατήρησης για κάθε συστατικό στο δείγμα.
Τι είναι το UPLC;
Ο όρος UPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Είναι μια παραλλαγή της HPLC, αλλά η μέθοδος λειτουργίας είναι η ίδια. Ωστόσο, σε αντίθεση με την HPLC, αυτή η μέθοδος επιτρέπει την ανάλυση πολύ μικρών σωματιδίων, όπως μικρά σωματίδια 2 μικρομέτρων.
Εικόνα 02: Μια συσκευή UPLC
Επιπλέον, παρέχει ταχύτερη ανάλυση. Σε αυτή την τεχνική, χρησιμοποιούμε πίεση αντλίας 100 MPa για την εισαγωγή του δείγματος στη στήλη. Ως εκ τούτου, αυτή η υψηλή πίεση επιβεβαιώνει ότι ολόκληρο το δείγμα εισάγεται στη στήλη. Έτσι, αυτό είναι πολύ αποτελεσματικό σε σύγκριση με το HPLC.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC;
Ο όρος HPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης, ενώ ο όρος UPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υπερυψηλής Απόδοσης. Επομένως, η τεχνική UPLC είναι μια ανεπτυγμένη έκδοση της HPLC. Έτσι, ο τρόπος λειτουργίας είναι ο ίδιος και για τις δύο τεχνικές. Ωστόσο, το UPLC είναι πιο αποτελεσματικό σε σύγκριση με το HPLC επειδή χρησιμοποιεί υψηλή πίεση αντλίας. η πίεση της αντλίας για HPLC είναι 40 MPA ενώ είναι 100 MPa για UPLC. Επομένως, αυτή είναι μια διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC. Πάνω απ 'όλα, η βασική διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC είναι ότι η HPLC επιτρέπει την ανάλυση σωματιδίων που έχουν το μέγεθός τους περίπου 5 μικρόμετρα, ενώ το UPLC επιτρέπει πολύ μικρότερα σωματίδια περίπου 2 μικρόμετρα.
Σύνοψη – HPLC έναντι UPLC
Το UPLC είναι μια μορφή HPLC. Έτσι, οι μέθοδοι λειτουργίας είναι οι ίδιες. Όμως, μπορούμε να βρούμε κάποιες βελτιωμένες δυνατότητες στο UPLC σε σύγκριση με το HPLC. Επομένως, υπάρχει κάποια διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC. Ωστόσο, η βασική διαφορά μεταξύ HPLC και UPLC είναι ότι το HPLC επιτρέπει την ανάλυση σωματιδίων που έχουν το μέγεθός τους περίπου 5 μικρόμετρα, ενώ το UPLC επιτρέπει πολύ μικρότερα σωματίδια περίπου 2 μικρόμετρα.
