Η βασική διαφορά μεταξύ άμεσου και έμμεσου ανοσοφθορισμού είναι ότι ο άμεσος ανοσοφθορισμός χρησιμοποιεί ένα μόνο αντίσωμα που δρα ενάντια στον στόχο ενδιαφέροντος ενώ ο έμμεσος ανοσοφθορισμός χρησιμοποιεί δύο αντισώματα για την επισήμανση του στόχου ενδιαφέροντος.
Ο ανοσοφθορισμός ή η κυτταρική απεικόνιση είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για την επισήμανση ενός συγκεκριμένου αντιγόνου στόχου με ένα φθοροφόρο. Εδώ, το φθοροφόρο είναι μια φθορίζουσα χημική ένωση που μπορεί να εκπέμπει ξανά φως κατά τη διέγερση του φωτός. Όταν ένα φθοροφόρο συνδέεται με το αντιγόνο στόχο, επιτρέπει την ανίχνευση του μορίου στόχου στο δείγμα. Για να το περιγράψουμε περαιτέρω, όταν ένα αντιγόνο συνδέεται με ένα συγκεκριμένο αντίσωμα, μπορεί να συζευχθεί με φθοροφόρα. Ως εκ τούτου, είναι εύκολο να ανιχνευθεί η παρουσία του αντιγόνου στόχου στο δείγμα κατά την παρατήρηση κάτω από το μικροσκόπιο φθορισμού.
Εξάλλου, υπάρχουν δύο τύποι ανοσοφθορισμού. άμεσο και έμμεσο ανοσοφθορισμό. Η διαφορά μεταξύ του άμεσου και του έμμεσου ανοσοφθορισμού έγκειται κυρίως στον αριθμό των αντισωμάτων που χρησιμοποιούνται και στη σύζευξη φθοροφόρων. Δηλαδή, στον άμεσο ανοσοφθορισμό, το φθοροφόρο συζεύγνυται απευθείας με το πρωτεύον αντίσωμα ενώ στον έμμεσο ανοσοφθορισμό, το φθοροφόρο συζεύγνυται με το δευτερεύον αντίσωμα.
Τι είναι ο άμεσος ανοσοφθορισμός;
Ο ανοσοφθορισμός χρησιμοποιεί αντισώματα για την ανίχνευση συγκεκριμένων αντιγόνων-στόχων. Ο άμεσος ανοσοφθορισμός είναι ένας από τους δύο τύπους ανοσοφθορισμού. Στον άμεσο ανοσοφθορισμό, εμπλέκεται ένα μόνο αντίσωμα (πρωτεύον αντίσωμα) και το φθοροφόρο συζεύγνυται απευθείας με το πρωτεύον αντίσωμα. Κατά τη σύνδεση του αντισώματος με το αντιγόνο στόχο, το φθοροφόρο εκπέμπει φθορισμό που μπορεί να ανιχνευθεί με μικροσκόπιο φθορισμού.
Εικόνα 01: Άμεσος ανοσοφθορισμός
Ωστόσο, ο άμεσος ανοσοφθορισμός είναι μια δαπανηρή μέθοδος αφού τα πρωτεύοντα συζευγμένα αντισώματα είναι δαπανηρά σε σύγκριση με τα δευτερεύοντα αντισώματα. Ωστόσο, δεν περιλαμβάνει ένα πρόσθετο βήμα, επομένως, μια πιο σύντομη τεχνική. Επιπλέον, οι μη ειδικές δεσμεύσεις μειώνονται στον άμεσο ανοσοφθορισμό. Ως εκ τούτου, η διασταυρούμενη αντιδραστικότητα των ειδών είναι χαμηλή. Αλλά στην ανίχνευση, η ευαισθησία του άμεσου ανοσοφθορισμού είναι ασθενής σε σύγκριση με τον έμμεσο ανοσοφθορισμό.
Τι είναι ο Έμμεσος Ανοσοφθορισμός;
Ο έμμεσος ανοσοφθορισμός είναι ο δεύτερος τύπος ανοσοφθορισμού που περιλαμβάνει δύο τύπους αντισωμάτων, όπως πρωτογενή και δευτερογενή αντισώματα στη σήμανση του αντιγόνου στόχου. Σε αυτή τη μέθοδο, το φθοροφόρο συζεύγνυται με το δευτερεύον αντίσωμα. Επομένως, αυτή η τεχνική περιλαμβάνει ένα επιπλέον βήμα.
Εικόνα 02: Ανοσοφθορισμός
Ωστόσο, η ευαισθησία είναι υψηλή σε αυτή τη μέθοδο, καθώς πολλά φθοροφόρα μπορούν να συζευχθούν με δευτερεύοντα αντισώματα και διευκολύνει την ανίχνευση. Επιπλέον, ο έμμεσος ανοσοφθορισμός είναι λιγότερο δαπανηρός λόγω του γεγονότος ότι η σύζευξη δευτερογενών αντισωμάτων είναι λιγότερο δαπανηρή και ευκολότερη. Σε σύγκριση με τον άμεσο ανοσοφθορισμό, η διασταυρούμενη αντιδραστικότητα των ειδών είναι υψηλή στην έμμεση μέθοδο.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ του άμεσου και του έμμεσου ανοσοφθορισμού;
- Είναι δύο τύποι τεχνικής ανοσοφθορισμού.
- Πρωτογενή αντισώματα και φθοροφόρο εμπλέκονται και στις δύο μεθόδους.
- Επίσης, η αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος εμφανίζεται και στις δύο μεθόδους.
- Επιπλέον, τόσο ο άμεσος όσο και ο έμμεσος ανοσοφθορισμός χρησιμοποιούν μικροσκόπιο φθορισμού για την ανίχνευση αντιγόνου.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ του άμεσου και του έμμεσου ανοσοφθορισμού;
Ο ανοσοφθορισμός μπορεί να είναι άμεσος ή έμμεσος με βάση τη σύζευξη φθοροφόρων με τα χρησιμοποιούμενα αντισώματα. Σε άμεσο ανοσοφθορισμό, το φθοροφόρο συζεύγνυται με το πρωτεύον αντίσωμα, το οποίο είναι το μοναδικό αντίσωμα που εμπλέκεται σε αυτή την τεχνική. Σε αντίθεση με αυτό, στον έμμεσο ανοσοφθορισμό, το φθοροφόρο συζεύγνυται με το δευτερεύον αντίσωμα, το οποίο είναι ένας από τους δύο τύπους αντισωμάτων που εμπλέκονται στην τεχνική. Ως εκ τούτου, η κύρια διαφορά μεταξύ του άμεσου και του έμμεσου ανοσοφθορισμού είναι ο τύπος αντισώματος που συζευγνύεται με το φθοροφόρο.
Το παρακάτω infographic παρέχει μια παράπλευρη σύγκριση της διαφοράς μεταξύ άμεσου και έμμεσου ανοσοφθορισμού.
Σύνοψη – Άμεσος έναντι Έμμεσης Ανοσοφθορισμού
Ο ανοσοφθορισμός είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση της παρουσίας ειδικών αντιγόνων σε ένα δείγμα. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί ειδικά αντισώματα. Επομένως, σε αυτό, τα αντισώματα συζευγνύονται με φθοροφόρα για να τα ανιχνεύσουν χρησιμοποιώντας ένα μικροσκόπιο φθορισμού. Επιπλέον, υπάρχουν δύο τύποι ανοσοφθορισμού και συγκεκριμένα, ο άμεσος και ο έμμεσος ανοσοφθορισμός. Ο άμεσος ανοσοφθορισμός περιλαμβάνει ένα μόνο αντίσωμα και φθοροφόρο απευθείας συζευγμένο με αυτό το αντίσωμα. Ο έμμεσος ανοσοφθορισμός περιλαμβάνει δύο αντισώματα. πρωτογενές και δευτερογενές και φθοροφόρο συζευγμένο με το δευτερογενές αντίσωμα. Δεδομένου ότι πολλά δευτερεύοντα αντισώματα μπορούν να συνδεθούν με ένα πρωτεύον αντίσωμα και πολλά φθοροφόρα μπορούν να συζευχθούν με δευτερεύοντα αντισώματα, ο έμμεσος ανοσοφθορισμός είναι μια πιο ευαίσθητη μέθοδος από την άμεση μέθοδο. Επιπλέον, η έμμεση μέθοδος είναι λιγότερο δαπανηρή από την άμεση μέθοδο. Έτσι, αυτή είναι η διαφορά μεταξύ του άμεσου και του έμμεσου ανοσοφθορισμού.
