Η βασική διαφορά μεταξύ του Elisa και του western blot είναι ότι το Elisa ή η ενζυμική ανοσοδοκιμασία είναι ένα διαγνωστικό εργαλείο που ανιχνεύει εάν ο ασθενής έχει εκτεθεί σε συγκεκριμένο τύπο ιού ή άλλο μολυσματικό παράγοντα, ενώ το western blot είναι μια τεχνική που ανιχνεύει μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη από ένα δείγμα πρωτεΐνης.
Το AIDS έχει γίνει παγκόσμιο πρόβλημα και η συχνότητα αυτής της θανατηφόρας ασθένειας έχει αυξηθεί ανησυχητικά τις τελευταίες δεκαετίες. Τα τεστ HIV ανιχνεύουν την παρουσία του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας ((HIV) που προκαλεί αυτό το σύνδρομο. Από τα διάφορα τεστ HIV, το ELISA και το Western Blot είναι πολύ δημοφιλή σήμερα. Το ELISA σημαίνει ανοσοπροσροφητικός προσδιορισμός συνδεδεμένης με ένζυμο, που είναι μια τεχνική ανάλυσης που βασίζεται σε πλάκες. Είναι μια ενζυμική ανοσοδοκιμασία που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων HIV. Το Western blot ανιχνεύει μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη από ένα μείγμα πρωτεϊνών με τη χρήση ενός επισημασμένου αντισώματος.
Βασική διαφορά
1. Επισκόπηση και βασική διαφορά
2. Τι είναι η Elisa
3. Τι είναι ένα Western Blot
4. Ομοιότητες μεταξύ Elisa και Western Blot
5. Σύγκριση δίπλα-δίπλα – Elisa εναντίον Western Blot σε μορφή πίνακα
6. Περίληψη
Τι είναι η Elisa;
Το ELISA, που σημαίνει ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία, ήταν το πρώτο τεστ που σχεδιάστηκε κυρίως για την ανίχνευση του HIV. Είναι μια ανάλυση που βασίζεται σε πλάκες. Χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων HIV και αυτό το τεστ δείχνει υψηλή ευαισθησία. Σε αυτή την τεχνική, τα αντιγόνα στο δείγμα συνδέονται με τα ακινητοποιημένα αντισώματα σε μια στερεή επιφάνεια. Μόλις ακινητοποιηθούν, τα αντιγόνα σχηματίζουν σύμπλοκα με αντισώματα συνδεδεμένα με ένζυμα. Στη συνέχεια αυτά τα συζευγμένα ένζυμα επωάζονται με το αντίστοιχο υπόστρωμα.
Εικόνα 01: ELISA
Η αντίδραση ενζύμου-υποστρώματος παράγει ένα μετρήσιμο έγχρωμο προϊόν. Με τη μέτρηση της ποσότητας του προϊόντος, ο αριθμός των αντιγόνων που υπάρχουν στο δείγμα μπορεί να ποσοτικοποιηθεί. Επομένως, η ELISA είναι μια πολύ συγκεκριμένη και εξελιγμένη τεχνική που απαιτεί την προσοχή άρτια καταρτισμένων τεχνικών. Είναι επίσης μια χρονοβόρα διαδικασία με απαίτηση προηγμένου εξοπλισμού.
Τι είναι το Western Blot;
Το Western blotting είναι μια τεχνική που επιτρέπει την ανίχνευση μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης από ένα μείγμα πρωτεϊνών. Το Western blot είναι η μεμβράνη που χρησιμοποιείται κατά τη διαδικασία στύπωσης για να ληφθεί η κατοπτρική εικόνα των πρωτεϊνικών μοτίβων στο πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου SDS. Η μεμβράνη που χρησιμοποιείται για το western blotting αποτελείται κυρίως από νιτροκυτταρίνη ή διφθοριούχο πολυβινυλιδένιο (PVDF). Η μεμβράνη με τη μεταφερόμενη πρωτεΐνη μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την αναγνώριση μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης. Απαιτείται ένα αντίσωμα υψηλής ποιότητας για την ανίχνευση της επιθυμητής πρωτεΐνης με υβριδισμό. Το αντίσωμα συνδέεται με το ειδικό του αντιγόνο και αποκαλύπτει την παρουσία του επιθυμητού αντιγόνου, που είναι μια πρωτεΐνη.
Εικόνα 02: Western Blot
Η μεταφορά των πρωτεϊνών από το πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου SDS στο στύπωμα western πραγματοποιείται με ηλεκτροστύπωμα. Είναι μια αποτελεσματική και γρήγορη μέθοδος που αναγκάζει τις πρωτεΐνες να ηλεκτροφορήσουν έξω από το τζελ και να περάσουν στη μεμβράνη νιτροκυτταρίνης (western blot).
Το Western blotting είναι χρήσιμο για την ανίχνευση αντισωμάτων κατά του HIV στο δείγμα ανθρώπινου ορού. Το Western blot μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ως επιβεβαιωτική εξέταση για λοίμωξη από ηπατίτιδα Β και οριστική εξέταση για τη νόσο των τρελών αγελάδων.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ Elisa και Western Blot;
- Η Elisa και το western blot είναι δύο τύποι τεχνικών που χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση του HIV.
- Και οι δύο μέθοδοι βασίζονται στην ανοσοανίχνευση.
- Βασίζονται στον σχηματισμό του συμπλέγματος αντισώματος-πρωτεΐνης.
- Και οι δύο μέθοδοι μπορούν να αναλύσουν πρωτεΐνες.
- Η Elisa και το western blotting είναι χρονοβόρες τεχνικές.
- Απαιτείται καλά εκπαιδευμένο και εξειδικευμένο προσωπικό για την εφαρμογή αυτών των τεχνικών.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ Elisa και Western Blot;
Το ELISA είναι μια πολύ ευαίσθητη και πολύ εξελιγμένη μέθοδος που ανιχνεύει την παρουσία αντιγόνου και αντισωμάτων στο αίμα του ασθενούς, ενώ το western blot είναι μια τεχνική που ανιχνεύει μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη από ένα μείγμα πρωτεϊνών. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της Elisa και του western blot. Η Elisa είναι ποιοτική όσο και ποσοτική. Αντίθετα, το western blot είναι ποιοτικό. Μερικές φορές είναι ημιποσοτική. Όταν λαμβάνεται υπόψη ο χρόνος που απαιτείται για τη δοκιμή, το τεστ Elisa είναι χρονοβόρο ενώ το western blot είναι πιο χρονοβόρο από το Elisa.
Το παρακάτω infographic συνοψίζει τη διαφορά μεταξύ Elisa και western blot.
Σύνοψη – Elisa εναντίον Western Blot
Το ELISA είναι μια πολύ ευαίσθητη και πολύ εξελιγμένη μέθοδος που ανιχνεύει την παρουσία αντιγόνου και αντισωμάτων στο αίμα μας. Από την άλλη πλευρά, η τεχνική Western blotting έχει αναπτυχθεί για την αναγνώριση μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης από ένα μείγμα πρωτεϊνών. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της Elisa και του Western blot. Το ELISA ήταν το πρώτο τεστ που σχεδιάστηκε για την ανίχνευση του HIV. Προκειμένου να επιβεβαιωθούν τα αποτελέσματα της δοκιμής ELISA, μπορεί να χρησιμοποιηθεί Western Blot. Τόσο η ELISA όσο και η Western Blot θεωρούνται έμμεσες μέθοδοι για την ανίχνευση του HIV.
