Η βασική διαφορά μεταξύ RIA και ELISA είναι ότι η ραδιοανοσοδοκιμασία (RIA) είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού που χρησιμοποιεί ραδιοϊσότοπα για την ανίχνευση συμπλεγμάτων αντιγόνου-αντισώματος, ενώ η ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA) είναι μια τεχνική ανοσοδοκιμασίας που χρησιμοποιεί ένζυμα για την ανίχνευση αντιγόνου -συμπλέγματα αντισωμάτων.
Η ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών όπως τα αντιγόνα είναι εξαιρετικά σημαντική στη διάγνωση της νόσου. Επομένως, η RIA και η ELISA είναι δύο τεχνικές ανοσοδοκιμασίας που χρησιμοποιούνται σε εργαστήρια για την ταχεία ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών, ιδιαίτερα αντιγόνων. Γενικά, ένα ειδικό αντίσωμα συνδέεται με το αντιγόνο-στόχο και σχηματίζει ένα ορατό σύμπλεγμα γνωστό ως κατακρημνιστήριο. Αυτά τα σύμπλοκα αντισωμάτων και αντιγόνων μπορούν να αναγνωριστούν μέσω διαφορετικών τεχνικών. Η τεχνική ανίχνευσης του συμπλέγματος αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ραδιοϊσοτόπων είναι γνωστή ως RIA και η τεχνική ανίχνευσης του συμπλέγματος αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ενζύμων είναι γνωστή ως ELISA.
Τι είναι η RIA;
Η Radioimmunoassay (RIA) είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού που ανιχνεύει σύμπλοκα αντιγόνων και αντισωμάτων χρησιμοποιώντας ραδιοϊσότοπα. Η Rosalyn Sussman Yalow ανέπτυξε αυτή την τεχνική το 1960 με τη βοήθεια του Solomon Berson. Για αυτήν την αξιοσημείωτη ανακάλυψη, η Rosalyn Sussman Yalow κέρδισε το βραβείο Νόμπελ ιατρικής το 1977. Συνήθως, στη ραδιοανοσοδοκιμασία, μια γνωστή ποσότητα ενός αντιγόνου γίνεται για πρώτη φορά ραδιενεργή Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί συχνά γ-ραδιενεργά ισότοπα ιωδίου, που ονομάζονται 125-I, για την επισήμανση αντιγόνα. Αυτά τα ραδιοϊσότοπα συνήθως συνδέονται με το αμινοξύ τυροσίνης του αντιγόνου. Στη συνέχεια το ραδιοσημασμένο αντιγόνο αναμιγνύεται με αντίσωμα. Ως αποτέλεσμα, το ραδιοσημασμένο αντιγόνο και το αντίσωμα συνδέονται ειδικά μεταξύ τους.
Αργότερα, προστίθεται δείγμα ορού που περιέχει άγνωστη ποσότητα του ίδιου αντιγόνου. Αυτό αναγκάζει το μη επισημασμένο αντιγόνο από τον ορό να ανταγωνίζεται το ραδιοσημασμένο αντιγόνο για θέσεις δέσμευσης αντισωμάτων. Καθώς η συγκέντρωση του μη επισημασμένου αντιγόνου αυξάνεται, περισσότερο από αυτό συνδέεται με το αντίσωμα, εκτοπίζοντας τη ραδιοσημασμένη παραλλαγή. Έτσι, μειώνει την αναλογία του συνδεδεμένου με αντίσωμα ραδιοσημασμένου αντιγόνου προς το ελεύθερο ραδιοσημασμένο αντιγόνο. Στο τέλος της διαδικασίας, τα δεσμευμένα αντιγόνα διαχωρίζονται. Τελικά, η ραδιενέργεια των ελεύθερων αντιγόνων στο εναπομείναν υπερκείμενο μετριέται χρησιμοποιώντας έναν μετρητή γάμμα.
Τι είναι η ELISA;
Το ELISA είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού που ανιχνεύει σύμπλοκα αντιγόνων και αντισωμάτων χρησιμοποιώντας ένζυμα. Είναι μια βιοχημική αναλυτική δοκιμασία που περιγράφηκε για πρώτη φορά από τους Engvall και Perlmann το 1971. Στις περισσότερες απλές μορφές τεχνικών ELISA, τα αντιγόνα του δείγματος του ασθενούς συνδέονται σε μια στερεή επιφάνεια. Στη συνέχεια, ένα αντίστοιχο αντίσωμα εφαρμόζεται στην επιφάνεια, ώστε να μπορεί να συνδεθεί με το αντιγόνο.
Εικόνα 01: ELISA
Αυτό το συγκεκριμένο αντίσωμα συνδέεται με ένα ένζυμο. Αργότερα, τυχόν μη δεσμευμένα αντισώματα αφαιρούνται με πλύσιμο με απορρυπαντικό. Στο τελευταίο βήμα αυτής της τεχνικής, προστίθεται το υπόστρωμα του ενζύμου. Εάν υπάρχει σωστή δέσμευση αντιγόνου και αντισώματος, η επακόλουθη αντίδραση παράγει ένα ανιχνεύσιμο χρωματικό σήμα, συνηθέστερα μια αλλαγή χρώματος.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ RIA και ELISA;
- RIA και ELISA είναι τεχνικές ανοσοπροσδιορισμού.
- Και οι δύο τεχνικές διαθέτουν σχηματισμό συμπλόκου αντιγόνου και αντισωμάτων.
- Αυτές οι τεχνικές μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ανίχνευση άγνωστων πρωτεϊνών σε δείγματα.
- Χρησιμοποιούνται και τα δύο στη διάγνωση ασθενειών στα εργαστήρια.
- Και οι δύο είναι πολύ συγκεκριμένες και ευαίσθητες τεχνικές.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ RIA και ELISA;
Το RIA είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού για την ανίχνευση του συμπλέγματος αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ραδιοϊσοτόπων. Η ELISA είναι μια τεχνική ανοσοδοκιμασίας για την ανίχνευση του συμπλέγματος αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ενζύμων. Έτσι, αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ RIA και ELISA. Επιπλέον, στην τεχνική RIA, το αντιγόνο είναι σημασμένο, αλλά στην ELISA, το αντίσωμα επισημαίνεται. Επιπλέον, στην τεχνική RIA, τα μόρια σήμανσης είναι ραδιοϊσότοπα, ενώ στην ELISA, τα μόρια σήμανσης είναι ένζυμα. Επομένως, αυτή είναι μια άλλη διαφορά μεταξύ RIA και ELISA.
Το παρακάτω infographic δείχνει περισσότερες διαφορές μεταξύ RIA και ELISA σε μορφή πίνακα.
Σύνοψη – RIA vs ELISA
Οι ανοσοδοκιμασίες διαδραματίζουν πολύ σημαντικό ρόλο σε διάφορα βιοαναλυτικά περιβάλλοντα, όπως η κλινική διάγνωση, η βιοφαρμακευτική ανάλυση, η περιβαλλοντική παρακολούθηση, η βιοασφάλεια και οι δοκιμές τροφίμων. Από τη δεκαετία του 1960, έχει αναπτυχθεί ένα ευρύ φάσμα ανοσοδοκιμών. Η RIA και η ELISA είναι και οι δύο τεχνικές ανοσοδοκιμασίας. Το RIA είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού για την ανίχνευση συμπλόκου αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ραδιοϊσοτόπων. Η ELISA είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού για την ανίχνευση συμπλόκου αντιγόνου-αντισώματος με χρήση ενζύμων. Έτσι, αυτή είναι η περίληψη της διαφοράς μεταξύ RIA και ELISA.
