Βασική διαφορά – HPLC έναντι LCMS
Ας δούμε πρώτα τη σημασία των HPLC και LCMS πριν αναλύσουμε τη διαφορά μεταξύ HPLC και LCMS. Η χρωματογραφία είναι μια τεχνική διαχωρισμού στη χημική ανάλυση όπου τα συστατικά του δείγματος διαχωρίζονται κατά τη διέλευση από ένα χρωματογραφικό μέσο. Περιλαμβάνει επίσης αλληλεπίδραση με το δείγμα, στατική φάση και κινητή φάση. Το HPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης και χρησιμοποιείται ως μέθοδος υγρής χρωματογραφίας στην αναλυτική χημεία. Ο συνδυασμός Υγρής Χρωματογραφίας και Φασματοσκοπίας Μάζας (LCMS) έχει αναπτυχθεί για την ποσοτική ανάλυση επιλεγμένων βιομορίων και είναι μια εξαιρετικά ευαίσθητη, ακριβής και ειδική διαδικασία προσδιορισμού σε σύγκριση με την HPLC. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ HPLC και LCMC. Αυτό το άρθρο θα σας παρουσιάσει τα HPLC και LCMC που ασχολούνται με τη χημική ανάλυση και συζητούν τις διαφορές μεταξύ HPLC και LCMS.
Τι είναι το HPLC;
Η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) είναι μια δημοφιλής τεχνική διαχωρισμού στην αναλυτική χημεία. Χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό των συστατικών, την αναγνώριση και την ποσοτικοποίηση κάθε συστατικού σε ένα μείγμα. Παλαιότερα, αυτή η μέθοδος ήταν γνωστή ως υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης επειδή εξαρτιόταν από τις αντλίες για να ρέει ένας υπό πίεση υγρός διαλύτης που περιελάμβανε το μίγμα του δείγματος μέσω μιας στήλης γεμάτη με στερεό προσροφητικό υλικό. Κάθε συστατικό στο μείγμα του δείγματος αλληλεπιδρά διαφορετικά με το στερεό προσροφητικό υλικό, με αποτέλεσμα διαφορετικούς ρυθμούς ροής για διαφορετικά συστατικά. Αυτό μπορεί να οδηγήσει στον διαχωρισμό των συστατικών καθώς ρέουν έξω από τη στήλη HPLC.
Το HPLC έχει χρησιμοποιηθεί για διάφορες εφαρμογές όπως η ανάλυση των επιπέδων βιταμίνης D στο αίμα, η παράνομη χρήση ναρκωτικών από αθλητές με την ανίχνευση των υπολειμμάτων φαρμάκων στα ούρα τους, η ταξινόμηση των συστατικών ενός σύνθετου βιολογικού δείγματος για ερευνητικούς σκοπούς και ανάλυση και την παραγωγή φαρμακευτικών προϊόντων.
Τι είναι το LCMS;
Η υγρή χρωματογραφία–φασματομετρία μάζας (LCMS) είναι μια αναλυτική τεχνική που συνδυάζει τις ικανότητες φυσικού διαχωρισμού της υγρής χρωματογραφίας με τις ικανότητες ανάλυσης μάζας της φασματομετρίας μάζας (MS). Η υγρή χρωματογραφία είναι μια τεχνική διαχωρισμού και η φασματομετρία μάζας χρησιμοποιείται για την ανάλυση της αναλογίας μάζας προς φορτίο φορτισμένων σωματιδίων. Ο φυσικός διαχωρισμός συνήθως επιτυγχάνεται με HPLC και εναλλακτικά, LCMS γνωστό και ως HPLC-MS. Το LCMS είναι μια κυρίαρχη αναλυτική τεχνική που έχει πολύ υψηλή ακρίβεια, ευαισθησία και ειδικότητα σε σύγκριση με την HPLC. Έτσι, είναι χρήσιμο σε πολλές εφαρμογές όπως ερευνητικούς σκοπούς, ανάλυση φαρμάκων, ανάλυση τροφίμων κ.λπ. Το LCMS χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό, την ανίχνευση, την αναγνώριση και την ποσοτικοποίηση των βιοχημικών ιδιοτήτων ενός συγκεκριμένου δείγματος παρουσία πολύπλοκων χημικών μιγμάτων.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ HPLC και LCMC;
Ακρωνύμιο και ορισμός HPLC και LCMC
HPLC: Το HPLC σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης. Είναι μια τεχνική διαχωρισμού που χρησιμοποιείται κυρίως για τον διαχωρισμό των συστατικών, την αναγνώριση και την ποσοτικοποίηση κάθε συστατικού σε ένα μείγμα.
LCMS: Το LCMS σημαίνει Υγρή Χρωματογραφία και Φασματομετρία Μάζας. Είναι μια αναλυτική τεχνική που συνδυάζει τις ικανότητες φυσικού διαχωρισμού της υγρής χρωματογραφίας με τις ικανότητες ανάλυσης μάζας της φασματομετρίας μάζας (MS).
Χαρακτηριστικά HPLC και LCMC
Ταξινόμηση
HPLC: Αυτή είναι μόνο μέθοδος υγρής χρωματογραφίας.
LCMS: Πρόκειται για συνδυασμό της μεθόδου υγρής χρωματογραφίας και της μεθόδου φασματομετρίας μάζας.
Αποτελεσματικότητα
HPLC: Σε σύγκριση με το LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο αποτελεσματική και πιο αργή.
LCMS: Σε σύγκριση με το HPLC, η ανάλυση LCMS είναι αποτελεσματική και ταχύτερη.
Ευαισθησία
HPLC: Σε σύγκριση με το LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο ευαίσθητη.
LCMS: Σε σύγκριση με το HPLC, η ανάλυση LCMS είναι πιο ευαίσθητη.
Ειδικότητα
HPLC: Σε σύγκριση με το LCMS, η ανάλυση HPLC είναι λιγότερο συγκεκριμένη.
LCMS: Σε σύγκριση με το HPLC, η ανάλυση LCMS είναι πιο συγκεκριμένη.
Ακρίβεια
HPLC: Η HPLC δίνει λιγότερο ακριβή αποτελέσματα από το LCMS για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών ουσιών.
LCMS: Το LCMS δίνει πιο ακριβή αποτελέσματα από το HPLC για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών ουσιών.
Στοιχείο
HPLC: Η HPLC μπορεί να θεωρηθεί ως συστατικό του LCMS.
LCMS: Το LCMS δεν μπορεί να θεωρηθεί ως συστατικό του HPLC.
Πηγή ιόντων
HPLC: Η πηγή ιόντων δεν υπάρχει στο όργανο HPLC.
LCMS: Η πηγή ιόντων υπάρχει στο όργανο LCMS.
Εφαρμογές
HPLC: Τα ιόντα, τα πολυμερή, τα οργανικά μόρια και τα βιομόρια μπορούν να αναλυθούν χρησιμοποιώντας HPLC.
LCMS: Τα οργανικά μόρια και τα βιομόρια μπορούν να αναλυθούν. Σε αντίθεση με το HPLC, το LCMS μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εξέταση μιγμάτων που δεν έχουν διαλυθεί πλήρως.
Λειτουργία
HPLC: Το διάγραμμα ενός οργάνου HPLC δίνεται στο σχήμα 1 και συνήθως περιλαμβάνει έναν αυτόματο δειγματολήπτη, αντλίες και έναν ανιχνευτή. Ο δειγματολήπτης εισάγει το μίγμα του δείγματος στην κινητή φάση (μίγμα διαλυτών υπό πίεση όπως νερό, ακετονιτρίλιο και/ή μεθανόλη) που το μεταφέρει στη στήλη. Οι αντλίες παρέχουν την επιθυμητή ροή και σύνθεση της κινητής φάσης μέσω της στήλης. Η στήλη γεμίζεται με το προσροφητικό, το οποίο είναι ένα κοκκώδες στερεό σωματίδιο όπως πυρίτιο ή πολυμερή. Ο ανιχνευτής παράγει ένα σήμα ανάλογο με την ποσότητα της παρουσίας συστατικού δείγματος στη στήλη, επιτρέποντας επομένως την μετρήσιμη ανάλυση των επιλεγμένων συστατικών του δείγματος. Το όργανο HPLC ελέγχεται και η ανάλυση δεδομένων παρέχεται από ψηφιακό μικροεπεξεργαστή και λογισμικό χρήστη.
Εικόνα 1: Διάγραμμα οργάνου HPLC
LCMS: Το διάγραμμα του οργάνου LCMS δίνεται στο σχήμα 2. Το εκχύλισμα δείγματος εισάγεται στη στήλη που αποτελείται από HPLC. Αυτή η στήλη διατηρεί δείγματα μεταβολιτών με βάση φυσικούς χαρακτήρες και διαφορετικοί μεταβολίτες ρέουν στο φασματόμετρο μάζας σε διαφορετικά χρονικά διαστήματα. Η φασματοσκοπία μάζας χρησιμοποιείται για την εκτίμηση μαζών σωματιδίων, για τον προσδιορισμό της στοιχειακής διάταξης ενός μορίου και για την αποσαφήνιση των δομών του μορίου. Ωστόσο, το δείγμα θα πρέπει να ιονιστεί για να δημιουργηθούν φορτισμένα μόρια προκειμένου να προσδιοριστούν οι αναλογίες μάζας προς φορτίο. Επομένως, αντί για όργανα HPLC, το LCMS αποτελείται από επιπλέον τρεις ενότητες, όπως πηγή σιδήρου, αναλυτή μάζας και ανιχνευτή. Μια πηγή ιόντων μπορεί να μετατρέψει το δείγμα αέριας φάσης σε ιόντα και ένας αναλυτής μάζας που ομαδοποιεί τα ιόντα με τις μάζες τους χρησιμοποιώντας ηλεκτρομαγνητικά πεδία. Τέλος, ένας ανιχνευτής ποσοτικοποιεί τις τιμές και παρέχει δεδομένα για κάθε ιόν που υπάρχει στο δείγμα. Η τεχνική LCMS μπορεί να χρησιμοποιηθεί τόσο για ποιοτικές όσο και για ποσοτικές εφαρμογές.
Εικόνα 2: Διάγραμμα οργάνου LCMS
Συμπερασματικά, η HPLC είναι μια μέθοδος υγρής χρωματογραφίας ενώ η LCMS είναι ένας συνδυασμός υγρής χρωματογραφίας και φασματομετρίας μάζας. Και οι δύο αυτές τεχνικές ανάλυσης έχουν διαφορετικά χαρακτηριστικά, αλλά μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον προσδιορισμό και τον ποσοτικό προσδιορισμό συνθέσεων τροφίμων, φαρμακευτικών προϊόντων και άλλων βιοενεργών μορίων.
