Βασική διαφορά – In Situ Υβριδισμός έναντι Ανοσοϊστοχημείας
Η διάγνωση του καρκίνου και των μολυσματικών ασθενειών είναι μια δημοφιλής τάση όπου χρησιμοποιούνται νέες πρωτεϊνικές και γονιδιωματικές τεχνικές για τον εντοπισμό όγκων ή μολυσματικών κυττάρων, τον πολλαπλασιασμό τους και τις θέσεις ανάπτυξης των κυττάρων και την ανάλυση της γενετικής βάσης των περισσότερων μεταδοτικών και μεταδοτικών κυττάρων. μη μεταδοτικές ασθένειες. Αυτό θα οδηγήσει σε ακριβή επεξεργασία και σχεδιασμό φαρμάκων και στην ανάπτυξη εξατομικευμένων θεραπειών για ασθένειες. Ο in situ υβριδισμός (ISH) και η ανοσοϊστοχημεία (IHC) είναι δύο τέτοιες ευρέως χρησιμοποιούμενες τεχνικές στη βιολογία του καρκίνου και η βασική διαφορά μεταξύ του in situ υβριδισμού και της ανοσοχημείας έγκειται στα μόρια που χρησιμοποιούνται στη διαδικασία ανάλυσης. Στην ISH, οι ανιχνευτές νουκλεϊκού οξέος χρησιμοποιούνται στην ανάλυση ενώ, στην IHC, χρησιμοποιούνται μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα για τους διαγνωστικούς προσδιορισμούς.
Τι είναι η In Situ Hybridization (ISH);
Ο υβριδισμός in situ είναι μια τεχνική υβριδισμού νουκλεϊκού οξέος που εκτελείται απευθείας σε ένα τμήμα ή τμήμα ιστού, σε ολόκληρο τον ιστό ή σε κύτταρα. Η τεχνική εξαρτάται από τη θεωρία του ζεύγους συμπληρωματικών βάσεων Watson Crick, με αποτέλεσμα είτε υβρίδια DNA-DNA είτε υβρίδια DNA-RNA που μπορούν να ανιχνεύσουν μεταλλαγμένα γονίδια ή να αναγνωρίσουν το απαιτούμενο γονίδιο ενδιαφέροντος. Αλληλουχίες μονόκλωνου DNA, δίκλωνες αλληλουχίες DNA, μονόκλωνες αλληλουχίες RNA ή συνθετικές ολιγονουκλεοτιδικές αλληλουχίες χρησιμοποιούνται ως ανιχνευτές κατά τη διάρκεια της τεχνικής υβριδισμού και αυτοί οι ανιχνευτές επισημαίνονται με ραδιενεργό φώσφορο στο 5' άκρο του για διαδικασίες ταυτοποίησης με χρήση αυτοραδιογραφίας ή επισημασμένης αυτοραδιογραφίας. Υπάρχουν διάφοροι τύποι τεχνικών ISH που διατίθενται με βάση τον τύπο του ανιχνευτή που χρησιμοποιείται και τον τύπο της τεχνικής οπτικοποίησης που ακολουθείται.
Εικόνα 01: Φθορισμός In Situ Υβριδισμός
Υπάρχουν πολλές εφαρμογές της ISH, κυρίως στη μοριακή διάγνωση μολυσματικών ασθενειών, προκειμένου να εντοπιστεί η παρουσία παθογόνων και να επιβεβαιωθεί το παθογόνο μέσω μοριακής διάγνωσης. Χρησιμοποιείται επίσης στους τομείς της αναπτυξιακής βιολογίας, του καρυότυπου και της φυλογενετικής ανάλυσης και της φυσικής χαρτογράφησης των χρωμοσωμάτων.
Τι είναι η ανοσοϊστοχημεία (IHC);
Στην τεχνική της IHC, το κύριο μόριο που αναλύεται είναι το αντιγόνο. Κατά τη διάρκεια της IHC, χρησιμοποιούνται μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα για τον προσδιορισμό της παρουσίας αντιγόνων κατά τη μόλυνση ή την κατάσταση πολλαπλασιασμού κακοήθων κυττάρων. Η τεχνική βασίζεται στη δέσμευση αντιγόνου-αντισώματος και χρησιμοποιούνται ενζυμικές ετικέτες για αυτήν την τεχνική. Μια τέτοια εφαρμογή είναι η ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Οι δείκτες μπορεί επίσης να είναι αντισώματα με ετικέτα φθορισμού ή αντισώματα με ραδιοσήμανση.
Εικόνα 02: Ανοσοϊστοχημεία
Το IHC χρησιμοποιείται ευρέως για την ανίχνευση καρκινικών κυττάρων. Οι διαγνωστικές διαδικασίες στοχεύουν τα αντιγόνα που υπάρχουν στα καρκινικά κύτταρα για να αναγνωρίσουν και να χαρακτηρίσουν τον όγκο. Η ίδια διαδικασία ενσωματώνεται για τη διάγνωση μολυσματικών παραγόντων. Τα μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα χρησιμοποιούνται επίσης για την ανάλυση διαφορετικών γονιδιακών προϊόντων επιτρέποντας την αντίδραση δέσμευσης αντισώματος-αντιγόνου μεταξύ της επιθυμητής πρωτεΐνης και του συνθετικού αντισώματος που χορηγείται.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ του In Situ Υβριδισμού και της Ανοσοϊστοχημείας;
- ISH και IHC είναι πολύ ειδικές αντιδράσεις.
- Και οι δύο τεχνικές είναι πολύ ακριβείς.
- Και οι δύο τεχνικές μπορούν να χρησιμοποιηθούν στη διάγνωση για τον καρκίνο και τις μολυσματικές ασθένειες.
- Αυτές οι τεχνικές εκτελούνται σε αποστειρωμένα περιβάλλοντα in vitro.
- Και οι δύο είναι γρήγορες τεχνικές που παρέχουν αναπαραγώγιμα αποτελέσματα.
- ISH και IHC χρησιμοποιούν μεθόδους ανίχνευσης, όπως ραδιοσήμανση και τεχνικές φθορισμού.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ In Situ υβριδισμού και ανοσοϊστοχημείας;
In Situ Υβριδισμός εναντίον Ανοσοϊστοχημείας |
|
| Το ISH είναι μια τεχνική υβριδισμού νουκλεϊκού οξέος που εκτελείται απευθείας σε ένα τμήμα ή τμήμα του ιστού ή σε ολόκληρο τον ιστό. | IHC είναι μια τεχνική όπου χρησιμοποιούνται μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα για τον προσδιορισμό της παρουσίας αντιγόνων, τα οποία είναι ειδικοί δείκτες πρωτεΐνης που τοποθετούνται στις κυτταρικές επιφάνειες. |
| Τύπος βιολογικών μορίων που αναλύθηκαν | |
| ISH αναλύει νουκλεϊκά οξέα. | IHC αναλύει πρωτεΐνες-αντιγόνα. |
| Βάση βιοχημικής αντίδρασης | |
| Σε αυτήν την τεχνική εμφανίζεται συμπληρωματικό ζεύγος βάσεων μεταξύ DNA-DNA ή DNA-RNA. | Οι αλληλεπιδράσεις αντιγόνου-αντισώματος εμπλέκονται στην ανοσοϊστοχημεία. |
| Μέθοδοι ανίχνευσης που συνδέονται με ένζυμα | |
| Μέθοδοι ανίχνευσης που συνδέονται με ένζυμα δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν στην ISH. | Μέθοδοι ανίχνευσης που συνδέονται με ένζυμα μπορούν να χρησιμοποιηθούν στην IHC. |
Σύνοψη – In Situ Υβριδισμός εναντίον Ανοσοϊστοχημείας
Η μοριακή διάγνωση είναι γρήγορες και επιβεβαιωτικές μέθοδοι που μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τον εντοπισμό μιας μη μεταδοτικής ασθένειας όπως ο καρκίνος ή μια μεταδοτική ασθένεια όπως ο HIV ή η φυματίωση με βάση τους μοριακούς δείκτες που υπάρχουν στα κύτταρα που οδηγούν στην εκδήλωση της νόσου. Οι μοριακοί δείκτες μπορεί να υπάρχουν με τη μορφή εκφρασμένων πρωτεϊνών ή σε γενετικό επίπεδο βάσει των οποίων εισάγονται διαφορετικές νέες τεχνικές για την αύξηση της αποτελεσματικότητας και είναι λιγότερο επίπονες, αν και υπάρχει υψηλό κόστος με αυτές τις τεχνικές. Έτσι η ISH εξαρτάται από τον σχηματισμό υβριδίου DNA-DNA ή DNA-RNA και η IHC εξαρτάται από τις ειδικές αντιδράσεις μεταξύ αντισώματος και αντιγόνου. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ του in situ υβριδισμού.
Λήψη έκδοσης PDF του In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να τη χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τη σημείωση παραπομπής. Κατεβάστε την έκδοση PDF εδώ Διαφορά μεταξύ In Situ Υβριδισμού και Ανοσοϊστοχημείας.
