Βασική διαφορά – Ανοσοκυτταροχημεία έναντι ανοσοϊστοχημείας
Η Ανοσοκυτταροχημεία (ICC) και η Ανοσοϊστοχημεία (IHC) είναι δύο ευρέως χρησιμοποιούμενες τεχνικές στη μοριακή διάγνωση, οι οποίες προσδιορίζουν και επιβεβαιώνουν την εμφάνιση τόσο μη μεταδοτικών όσο και μεταδοτικών ασθενειών με βάση τους μοριακούς δείκτες που υπάρχουν στα κύτταρα. Η βασική διαφορά της ανοσοκυτταροχημείας και της ανοσοϊστοχημείας είναι το μόριο που χρησιμοποιείται ως διαδικασία ανάλυσης σε αυτές τις τεχνικές. Στο ICC, χρησιμοποιούνται πρωτογενή και δευτερογενή αντισώματα συζευγμένα με δείκτες όπως ο φθορισμός, ενώ IHC, μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα χρησιμοποιούνται για τους διαγνωστικούς προσδιορισμούς.
Τι είναι η Ανοσοκυτταροχημεία (ICC);
Το ICC χρησιμοποιεί πρωτογενή και δευτερογενή αντισώματα συνδεδεμένα με δείκτες όπως φθορίζοντες δείκτες ή ένζυμα και είναι μια ισχυρή μέθοδος ανίχνευσης για την ανίχνευση αντιγόνων που υπάρχουν στα κύτταρα-στόχους που μπορεί να είναι είτε μολυσματικά κυτταρικά σωματίδια είτε καρκινικά κύτταρα όγκου. Τρεις τύποι ελέγχων απαιτούνται για την ανοσοκυτταροχημεία.
- Πρωτεύον αντίσωμα – έλεγχος που δείχνει την ειδικότητα του πρωτεύοντος αντισώματος που δεσμεύεται με το αντιγόνο
- Δευτερογενές αντίσωμα – έλεγχος που δείχνει ότι η ετικέτα είναι ειδική για το πρωτεύον αντίσωμα
- Στοιχεία ελέγχου ετικετών – να δείξετε ότι η επισήμανση είναι το αποτέλεσμα της ετικέτας που προστέθηκε και όχι το αποτέλεσμα της ενδογενούς επισήμανσης.
Εικόνα 01: Η ανοσοκυτταροχημεία επισημαίνει μεμονωμένες πρωτεΐνες εντός των κυττάρων (εδώ, η υδροξυλάση τυροσίνης στους άξονες των συμπαθητικών αυτόνομων νευρώνων φαίνεται με πράσινο χρώμα).
Ο κύριος έλεγχος αντισώματος είναι ειδικός για κάθε νέο αντίσωμα και δεν μπορεί να επαναληφθεί για κάθε πείραμα. Ο δευτερεύων έλεγχος αντισώματος έχει σχεδιαστεί με βάση το πρωτεύον αντίσωμα που χρησιμοποιήθηκε στο πείραμα και περιλαμβάνεται σε κάθε πείραμα. Το στοιχείο ελέγχου επισήμανσης περιλαμβάνεται εάν αλλάξει μια συνθήκη της διαδικασίας, αλλάξει το δείγμα ή αν βρεθεί μη αναμενόμενη επισήμανση.
Οι δύο κύριες εφαρμογές του ICC είναι η Ραδιοανοσο-Δοκιμασία (RIA) και η Ενζυμική Ανοσοροφητική Δοκιμασία (ELISA). Το πιο κοινό αντίσωμα που χρησιμοποιείται είναι η ανοσοσφαιρίνη G.
Τι είναι η ανοσοϊστοχημεία (IHC);
Στην ανοσοϊστοχημεία, το αρχικό δείγμα περιέχει μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα προκειμένου να προσδιοριστεί η παρουσία αντιγόνων σε ξένα κύτταρα. Αυτή η τεχνική βασίζεται στην ειδική αντίδραση δέσμευσης αντιγόνου-αντισώματος. Τα αντισώματα που χρησιμοποιούνται στην ανίχνευση μπορούν να επισημανθούν με διαφορετικούς δείκτες. μπορεί να είναι δείκτες φθορισμού, ραδιοσημασμένοι δείκτες ή χημικοί δείκτες. Μέσω της διευκόλυνσης της in vitro σύνδεσης μεταξύ του αντιγόνου και του στοχευόμενου αντισώματος, μπορεί να προσδιοριστεί η παρουσία ή η απουσία μιας συγκεκριμένης πρωτεΐνης ενός κυττάρου.
Εικόνα 02: Ανοσοϊστοχημική χρώση φυσιολογικού νεφρού με CD10
Επί του παρόντος, οι επιστήμονες ασχολούνται με την ανάπτυξη αντισωμάτων-στόχων για συγκεκριμένα αντιγόνα που υπάρχουν σε κύτταρα που μπορούν είτε να αναπτυχθούν ως κακοήθη καρκινικά κύτταρα είτε ως αντιγόνα που υπάρχουν σε μολυσματικούς παράγοντες όπως ο HIV.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ της ανοσοκυτταροχημείας και της ανοσοϊστοχημείας;
- Οι αντιδράσεις είναι εξαιρετικά συγκεκριμένες και ακριβείς στο ICC και το IHC.
- Οι εφαρμογές του ICC και του IHC περιλαμβάνουν διάγνωση καρκίνου και μολυσματικών ασθενειών.
- Οι στείρες συνθήκες θα πρέπει να διατηρούνται και στις δύο συνθήκες και θα πρέπει να εκτελούνται in vitro
- Και οι δύο τεχνικές παρέχουν αναπαραγώγιμα αποτελέσματα.
- Και τα δύο είναι γρήγορα.
- Η ραδιοσήμανση, οι τεχνικές φθορισμού χρησιμοποιούνται ως μέθοδοι ανίχνευσης τόσο στο ICC όσο και στο IHC.
- Και τα δύο βασίζονται στη σύζευξη αντιγόνου-αντισώματος.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της ανοσοκυτταροχημείας και της ανοσοϊστοχημείας;
Ανοσοκυτταροχημεία (ICC) vs Ανοσοϊστοχημεία (IHC) |
|
| Το ICC χρησιμοποιεί πρωτογενείς και δευτερογενείς δείκτες που συνδέονται με αντισώματα, όπως φθορίζοντες δείκτες ή ένζυμα και είναι μια ισχυρή μέθοδος ανίχνευσης για την ανίχνευση αντιγόνων που υπάρχουν στα κύτταρα-στόχους. | Το IHC είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιεί μονοκλωνικά και πολυκλωνικά αντισώματα για τον προσδιορισμό της παρουσίας αντιγόνων που είναι ειδικοί δείκτες πρωτεΐνης τοποθετημένοι στις κυτταρικές επιφάνειες. |
| Πηγή δείγματος | |
| Δείγματα που προέρχονται από ιστούς που έχουν υποστεί ιστολογική επεξεργασία σε λεπτές τομές χρησιμοποιούνται στο ICC. | IHC χρησιμοποιεί δείγματα που αποτελούνται από κύτταρα που έχουν αναπτυχθεί σε μονοστιβάδα ή κύτταρα σε εναιώρημα τα οποία εναποτίθενται σε αντικειμενοφόρο. |
| Επεξεργασία δείγματος | |
| Στο ICC, τα κύτταρα θα πρέπει να είναι διαπερατά για να διευκολύνουν τη διείσδυση αντισωμάτων στους ενδοκυτταρικούς στόχους. | Σε IHC, τα κύτταρα στερεώνονται με φορμαλίνη, ενσωματώνονται σε παραφίνη πριν από τη χρώση. |
Σύνοψη – Ανοσοκυτταροχημεία vs Ανοσοϊστοχημεία
Η μοριακή διάγνωση χρησιμοποιείται για τον εντοπισμό και την επιβεβαίωση της εμφάνισης τόσο μη μεταδοτικών ασθενειών όσο και μεταδοτικών ασθενειών με βάση τους μοριακούς δείκτες που υπάρχουν στα κύτταρα. Οι μοριακοί δείκτες μπορεί να είναι πρωτεΐνες ή αλληλουχίες DNA ή RNA. Η ανάπτυξη τεχνολογιών όπως το ICC και το IHC έχουν ανοίξει το δρόμο για τους επιστήμονες να εντοπίσουν την ασθένεια και την αιτία της σε πρώιμο στάδιο. Τόσο το ICC όσο και το IHC εξαρτώνται από τις ειδικές αντιδράσεις μεταξύ αντισώματος και αντιγόνου αν και η πηγή του δείγματος. Η κύρια διαφορά μεταξύ της ανοσοκυτταροχημείας και της ανοσοϊστοχημείας είναι η επεξεργασία του δείγματος των δύο διαδικασιών.
Λήψη έκδοσης PDF του Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να τη χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τη σημείωση παραπομπής. Κάντε λήψη της έκδοσης PDF εδώ Διαφορά μεταξύ της ανοσοκυτταροχημείας και της ανοσοϊστοχημείας.
