Βασική διαφορά – Κυτταρομετρία ροής έναντι FACS
Στο πλαίσιο της κυτταρικής θεωρίας, τα κύτταρα είναι η βασική δομική και λειτουργική μονάδα όλων των ζωντανών οργανισμών. Η ταξινόμηση κυττάρων είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό διαφορετικών κυττάρων σύμφωνα με τα φυσιολογικά και μορφολογικά χαρακτηριστικά. Μπορούν να έχουν ενδοκυτταρικά ή εξωκυτταρικά χαρακτηριστικά. Η αλληλεπίδραση του DNA, του RNA και των πρωτεϊνών θεωρούνται ως ενδοκυτταρικές αλληλεπιδραστικές ιδιότητες, ενώ το σχήμα, το μέγεθος και οι διαφορετικές επιφανειακές πρωτεΐνες θεωρούνται ως εξωκυτταρικές ιδιότητες. Στη σύγχρονη επιστήμη, οι μεθοδολογίες ταξινόμησης κυττάρων οδήγησαν στη βοήθεια της διαφορετικής έρευνας σε βιολογικές μελέτες και επίσης στη θέσπιση νέων αρχών μέσω της έρευνας στην ιατρική. Η διαλογή κυττάρων διεξάγεται με διάφορες μεθοδολογίες που περιλαμβάνουν τόσο πρωτόγονες με λιγότερο εξοπλισμό όσο και προηγμένες τεχνολογικές μεθοδολογίες με τη χρήση εξελιγμένων μηχανημάτων. Η κυτταρομετρία ροής, η διαλογή ενεργοποιημένων κυττάρων με φθορισμό (FACS), η επιλογή μαγνητικών κυττάρων και η ταξινόμηση ενός κυττάρου είναι οι κύριες μεθοδολογίες που χρησιμοποιούνται. Η κυτταρομετρία ροής και το FACS αναπτύσσονται για τη διαφοροποίηση των κυττάρων σύμφωνα με τις οπτικές τους ιδιότητες. Το FACS είναι ένας εξειδικευμένος τύπος κυτταρομετρίας ροής. Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση ενός ετερογενούς πληθυσμού κυττάρων σύμφωνα με διαφορετικά μόρια κυτταρικής επιφάνειας, μέγεθος και όγκο, η οποία επιτρέπει τη διερεύνηση μεμονωμένων κυττάρων. Το FACS είναι μια διαδικασία με την οποία ένα μίγμα δείγματος κυττάρων ταξινομείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού σε δύο ή περισσότερα δοχεία. Αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της κυτταρομετρίας ροής και του FACS.
Τι είναι η κυτταρομετρία ροής;
Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται για την εξέταση και τον προσδιορισμό της έκφρασης των ενδοκυτταρικών μορίων και της κυτταρικής επιφάνειας και για τον καθορισμό και τον χαρακτηρισμό διαφορετικών τύπων κυττάρων. Χρησιμοποιείται επίσης για τον προσδιορισμό του όγκου και του μεγέθους των κυττάρων και για την αξιολόγηση της καθαρότητας των υποπληθυσμών που απομονώνονται. Αυτό επιτρέπει την αξιολόγηση πολλαπλών παραμέτρων μεμονωμένων κελιών την ίδια περίπου στιγμή. Η κυτταρομετρία ροής χρησιμοποιείται για τη μέτρηση της έντασης του φθορισμού που παράγεται λόγω των επισημασμένων με φθορισμό αντισωμάτων που βοηθούν στον εντοπισμό πρωτεϊνών ή συνδετών που συνδέονται με τα σχετικά κύτταρα.
Εικόνα 01: Κυτταρομετρία ροής
Γενικά, η κυτταρομετρία ροής περιλαμβάνει κυρίως τρία υποσυστήματα. Είναι τα ρευστά, τα ηλεκτρονικά και τα οπτικά. Στην κυτταρομετρία ροής, είναι διαθέσιμα πέντε κύρια συστατικά που χρησιμοποιούνται στην ταξινόμηση κυττάρων. Είναι, μια κυψέλη ροής (ένα ρεύμα υγρού που χρησιμοποιείται για τη μεταφορά τους και την ευθυγράμμιση των κυψελών για τη διαδικασία οπτικής ανίχνευσης), ένα σύστημα μέτρησης (μπορεί να αποτελείται από διαφορετικά συστήματα, όπως λαμπτήρες υδραργύρου και ξένον, υδρόψυκτο υψηλής ισχύος ή αερόψυκτα λέιζερ χαμηλής ισχύος ή λέιζερ διόδου), ένα ADC. Σύστημα μετατροπέα αναλογικού σε ψηφιακό, σύστημα ενίσχυσης και υπολογιστής για ανάλυση. Η απόκτηση είναι η διαδικασία με την οποία συλλέγονται τα δεδομένα από τα δείγματα χρησιμοποιώντας κυτταρόμετρο ροής. Αυτή η διαδικασία διαμεσολαβείται από έναν υπολογιστή που είναι συνδεδεμένος με το κυτταρόμετρο ροής. Το λογισμικό που υπάρχει στον υπολογιστή αναλύει τις πληροφορίες που τροφοδοτούνται στον υπολογιστή από το κυτταρόμετρο ροής. Το λογισμικό έχει επίσης τη δυνατότητα να προσαρμόζει τις παραμέτρους του πειράματος ελέγχοντας το κυτταρόμετρο ροής.
Τι είναι FACS;
Στο πλαίσιο της κυτταρομετρίας ροής, η διαλογή κυττάρων ενεργοποιημένων με φθορισμό (FACS) είναι μια μέθοδος που χρησιμοποιείται στη διαφοροποίηση και τη διαλογή ενός δείγματος ενός μείγματος βιολογικών κυττάρων. Τα κύτταρα διαχωρίζονται από δύο ή περισσότερα δοχεία. Η μέθοδος ταξινόμησης βασίζεται στα φυσικά χαρακτηριστικά του κυττάρου που περιλαμβάνει τη σκέδαση φωτός και τα χαρακτηριστικά φθορισμού του κυττάρου. Αυτή είναι μια σημαντική επιστημονική τεχνική, η οποία μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να ληφθούν αξιόπιστα ποσοτικά και ποιοτικά αποτελέσματα των σημάτων φθορισμού που εκπέμπονται από κάθε κύτταρο. Κατά τη διάρκεια του FACS, αρχικά, το προ-ληφθέν μίγμα κυττάρων. ένα εναιώρημα κατευθύνεται στο κέντρο ενός στενού ρεύματος υγρού που ρέει γρήγορα. Η ροή του υγρού έχει σχεδιαστεί για να διαχωρίζει τα κύτταρα στο εναιώρημα με βάση τη διάμετρο κάθε στοιχείου. Ένας μηχανισμός δόνησης εφαρμόζεται στο ρεύμα της ανάρτησης που έχει ως αποτέλεσμα το σχηματισμό μεμονωμένων σταγονιδίων.
Εικόνα 02: FACS
Το σύστημα είναι βαθμονομημένο ώστε να δημιουργεί ένα μόνο σταγονίδιο με ένα κελί. Λίγο πριν από το σχηματισμό σταγονιδίων, το εναιώρημα ροής κινείται κατά μήκος μιας συσκευής μέτρησης φθορισμού που ανιχνεύει το χαρακτηριστικό φθορισμού κάθε κυττάρου. Στο σημείο σχηματισμού σταγονιδίων, τοποθετείται ένας ηλεκτρικός δακτύλιος φόρτισης ο οποίος προκαλείται φορτίο στον δακτύλιο πριν από τη μέτρηση της έντασης του φθορισμού. Μόλις σχηματιστούν τα σταγονίδια από το ρεύμα ανάρτησης, ένα φορτίο παγιδεύεται μέσα στα σταγονίδια το οποίο στη συνέχεια εισέρχεται σε ένα σύστημα ηλεκτροστατικής εκτροπής. Σύμφωνα με τη φόρτιση, το σύστημα εκτρέπει τα σταγονίδια σε διαφορετικά δοχεία. Η μέθοδος εφαρμογής της χρέωσης ποικίλλει ανάλογα με τα διαφορετικά συστήματα που χρησιμοποιούνται στο FACS. Ο εξοπλισμός που χρησιμοποιείται στο FACS είναι γνωστός ως διαλογέας κυττάρων ενεργοποιημένου φθορισμού.
Ποια είναι η ομοιότητα μεταξύ της κυτταρομετρίας ροής και του FACS;
Η κυτταρομετρία ροής και το FACS έχουν αναπτυχθεί για τη διαφοροποίηση των κυττάρων σύμφωνα με τις οπτικές τους ιδιότητες
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της κυτταρομετρίας ροής και του FACS;
Κυτταρομετρία ροής έναντι FACS |
|
| Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση ενός ετερογενούς πληθυσμού κυττάρων σύμφωνα με διαφορετικά μόρια κυτταρικής επιφάνειας, μέγεθος και όγκο, η οποία επιτρέπει τη διερεύνηση μεμονωμένων κυττάρων. | FACS είναι μια διαδικασία με την οποία ένα μίγμα δείγματος κυττάρων ταξινομείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού σε δύο ή περισσότερα δοχεία. |
Σύνοψη – Κυτταρομετρία ροής έναντι FACS
Το κύτταρο είναι η βασική δομική και λειτουργική μονάδα όλων των ζωντανών οργανισμών. Η κυτταρική ταξινόμηση είναι η διαδικασία με την οποία τα κύτταρα απομονώνονται και διαφοροποιούνται σε διαφορετικές κατηγορίες με βάση τις ενδοκυτταρικές και εξωκυτταρικές τους ιδιότητες. Η κυτταρομετρία ροής και το FACS είναι δύο σημαντικές μεθοδολογίες στην ταξινόμηση των κυττάρων. Και οι δύο διαδικασίες αναπτύσσονται για τη διαφοροποίηση των κυττάρων σύμφωνα με τις οπτικές τους ιδιότητες. Η κυτταρομετρία ροής είναι μια μεθοδολογία που χρησιμοποιείται κατά την ανάλυση ενός ετερογενούς πληθυσμού κυττάρων σύμφωνα με διαφορετικά μόρια κυτταρικής επιφάνειας, μέγεθος και όγκο, η οποία επιτρέπει τη διερεύνηση μεμονωμένων κυττάρων. Το FACS είναι μια διαδικασία με την οποία ένα μίγμα δείγματος κυττάρων ταξινομείται σύμφωνα με τα χαρακτηριστικά σκέδασης φωτός και φθορισμού σε δύο ή περισσότερα δοχεία. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ της κυτταρομετρίας ροής και του FACS.
Λήψη της έκδοσης PDF του Flow Cytometry vs FACS
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να τη χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τη σημείωση παραπομπής. Κάντε λήψη της έκδοσης PDF εδώ Διαφορά μεταξύ κυτταρομετρίας ροής και FACS
