Η βασική διαφορά μεταξύ Giemsa Stain και Leishman Stain είναι ότι η χρώση Giemsa είναι χρήσιμη στη χρώση περιοχών DNA διαφορετικών χρωμοσωμάτων για τη διερεύνηση διαφορετικών εκτροπών όπως μετατοπίσεις και αναδιατάξεις, ενώ η χρώση Leishman είναι χρήσιμη κατά τη χρώση και την ανάλυση με επίχρισμα αίματος για διαφοροποίηση και αναγνώριση τρυπανοσωμάτων, λευκοκυττάρων και παρασίτων ελονοσίας.
Η χρώση είναι ένα ζωτικό βήμα κατά την ενίσχυση της αντίθεσης μιας μικροσκοπικής εικόνας στο πλαίσιο της μικροσκοπίας, ειδικά για την ανάδειξη διαφορετικών δομών σε βιολογικά κύτταρα και ιστούς. Ο λεκές Giemsa και ο λεκές Leishman ανήκουν στην ομάδα των λεκέδων Romanowsky, η οποία περιλαμβάνει επίσης τη χρώση Wright και τη χρώση Jenner. Συνήθως, οι λεκέδες Romanowsky είναι χρήσιμες στη χρώση των επιχρισμάτων αίματος. Το χρησιμοποιούμε κυρίως κατά τη μελέτη της μορφολογίας των ερυθρών αιμοσφαιρίων και την απόδοση διαφορικού αριθμού λευκών αιμοσφαιρίων. Η ηωσίνη Υ και οι βαφές azure B είναι τα κοινά συστατικά για τους λεκέδες Romanowsky. Οι διαδικασίες χρώσης Romanowsky βοηθούν στη διάγνωση διαφορετικών παθήσεων όπως η λευχαιμία.
Τι είναι το Giemsa Stain;
Η χρώση Giemsa συνήθως βοηθά στη διαφοροποίηση μεταξύ της κυτταροπλασματικής και της πυρηνικής μορφολογίας των αιμοσφαιρίων όπως τα λευκά αιμοσφαίρια, τα ερυθρά αιμοσφαίρια και τα αιμοπετάλια. Επίσης, βοηθά στη διαφοροποίηση των παρασίτων. Κυρίως, χρησιμοποιείται για την κυτταρογενετική και στη διάγνωση της ελονοσίας και άλλων παρασιτικών ασθενειών. Επιπλέον, η χρώση Giemsa είναι ειδική για τις φωσφορικές ομάδες που υπάρχουν στο DNA. Προσκολλώνται στις περιοχές όπου υπάρχει μεγαλύτερος αριθμός δεσμών αδενίνης-θυμίνης στον κλώνο του DNA.
Εικόνα 01: Giemsa Stain
Επιπλέον, η χρώση Giemsa είναι επίσης χρήσιμη στη ζώνη Giemsa ή τη ζώνη G για τη χρώση χρωμοσωμάτων και τη δημιουργία καρυογραμμάτων. Επομένως, η χρώση Giemsa έχει την ικανότητα να εντοπίζει και να απεικονίζει διαφορετικές ανωμαλίες στα χρωμοσώματα. Για παράδειγμα, ο τροφοζωίτης του Trichomonas vaginalis, που εκκρίνει μια πρασινωπή έκκριση και αποτελείται από κινητά κύτταρα σε υγρά παρασκευάσματα, χρωματίζεται με χρώση Giemsa. Όπως αναφέρθηκε παραπάνω, η χρώση Giemsa λειτουργεί ως τυπική κηλίδα μεμβράνης αίματος. Όταν χρωματίζονται, τα ερυθρά αιμοσφαίρια χρωματίζονται σε ροζ, τα αιμοπετάλια χρωματίζονται σε ανοιχτό ή απαλό ροζ και το κυτταρόπλασμα των λεμφοκυττάρων, των μονοκυττάρων και των λευκοκυττάρων χρωματίζεται σε μπλε του ουρανού, απαλό μπλε και ματζέντα, αντίστοιχα.
Ο λεκές Giemsa είναι ένα μείγμα ηωσίνης, μπλε του μεθυλενίου και Azure B. Το μείγμα μεθυλενίου αζούρ που σχηματίζει ένα εωσινικό μαζί με το μπλε του μεθυλενίου σταθεροποιεί αυτό το μείγμα. Στη διαδικασία της χρώσης Giemsa, ένα λεπτό φιλμ του δείγματος τοποθετείται πρώτα σε μια μικροσκοπική αντικειμενοφόρο πλάκα. Το επόμενο βήμα είναι η στερέωση με καθαρή μεθανόλη για περίπου 30 δευτερόλεπτα προσθέτοντας μερικές σταγόνες μεθανόλης στη διαφάνεια. Στη συνέχεια, η αντικειμενοφόρος πλάκα βυθίζεται στο διάλυμα λεκέδων Giemsa 5% για περίπου 20-30 λεπτά. Το τελευταίο βήμα είναι να πλύνετε τη διαφάνεια με νερό βρύσης και να την αφήσετε να στεγνώσει.
Τι είναι το Leishman Stain;
Ο Σκωτσέζος παθολόγος William Boog Leishman είναι ο δημιουργός της χρώσης Leishman. Είναι ένας από τους λεκέδες που ανήκει στην ομάδα των λεκέδων Romanowsky. Επιπλέον, χρησιμοποιείται πιο συχνά στη διαφοροποίηση και την ταυτοποίηση διαφορετικών παρασίτων της ελονοσίας, των τρυπανοσωμάτων – ενός μονοκύτταρου μαστιγωμένου πρωτόζωου, τα οποία είναι παρασιτικά και λευκοκύτταρα.
Εικόνα 02: Λεκέδες Leishman
Η βάση της χρώσης Leishman είναι ένα μεθανολικό μείγμα που περιέχει ένα μείγμα μπλε του μεθυλενίου το οποίο είναι «πολυχρωμημένο». απομεθυλιώνονται σε διαφορετικούς τύπους αζούρες και ηωσίνη. Λόγω της σταθερότητας του μητρικού διαλύματος του μεθανολικού μείγματος, μπορούμε να το χρησιμοποιήσουμε απευθείας για τη στερέωση του επιχρίσματος, ενώ εξαλείφουμε το βήμα προθέσεως. Η σταθερότητα μειώνεται εάν το διάλυμα αναμιχθεί με ένα υδατικό ρυθμιστικό διάλυμα. Κατά την εκτέλεση διαφορικών μετρήσεων κυττάρων, η χρώση Leishman παρέχει χαρακτηριστικό λαμπερό ιώδες χρώμα στον πυρήνα και στους κόκκους ουδετερόφιλων. Έτσι, ενισχύει τη διαφοροποίηση μεταξύ του πυρήνα και του κυτταροπλάσματος. Επίσης, η χρώση Leishman παρέχει πιο ποιοτική αντίθεση χρώση σε σύγκριση με άλλες κηλίδες που έχουν βάση το μπλε του μεθυλενίου και την ηωσίνη.
Δεδομένου ότι διαφορετικά κυτταροπλασματικά συστατικά αντιμετωπίζονται έντονα για διαφοροποίηση και ταυτοποίηση, οι αιματολόγοι προτιμούν τη χρώση Leishman σε σύγκριση με άλλες χρώσεις Romanowsky. Στην ανίχνευση παρασίτων της ελονοσίας, οι διαδικασίες χρώσης Leishman είναι πιο ευαίσθητες και ακριβείς από άλλες κηλίδες, όπως η χρώση Field.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ του λεκέ Giemsa και του λεκέ Leishman;
- Ο λεκές Giemsa και ο λεκές Leishman είναι διαφορικοί λεκέδες.
- Και τα δύο είναι χρήσιμα κατά τη διενέργεια διαφορικών μετρήσεων λευκών αιμοσφαιρίων και τη μελέτη της κυτταρικής μορφολογίας των ερυθρών αιμοσφαιρίων.
- Επιπλέον, και οι δύο λεκέδες ανήκουν στην ομάδα των λεκέδων Romanowsky.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ του λεκέ Giemsa και του λεκέ Leishman;
Η χρώση Giemsa είναι χρήσιμη στη χρώση περιοχών DNA διαφορετικών χρωμοσωμάτων για τη διερεύνηση διαφορετικών εκτροπών όπως μετατοπίσεις και αναδιατάξεις, ενώ η χρώση Leishman είναι χρήσιμη στη χρώση αίματος για τη διαφοροποίηση και την αναγνώριση τρυπανοσωμάτων, λευκοκυττάρων και παρασίτων ελονοσίας. Έτσι, αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ του λεκέ Giemsa και του λεκέ Leishman.
Επιπλέον, ο βακτηριολόγος Gustav Giemsa ανέπτυξε την τεχνική χρώσης Giemsa, ενώ ο παθολόγος William Boog Leishman ανέπτυξε την τεχνική χρώσης Leishman. Επιπλέον, μια άλλη σημαντική διαφορά μεταξύ του λεκέ Giemsa και του λεκέ Leishman είναι η σύνθεση του λεκέ. Η χρώση Giemsa είναι ένα μείγμα ηωσίνης, μπλε του μεθυλενίου και Azure B ενώ η χρώση Leishman είναι ένα μεθανολικό μείγμα που περιέχει ένα μείγμα μπλε του μεθυλενίου.
Σύνοψη – Giemsa Stain vs Leishman Stain
Στο πλαίσιο της μικροσκοπίας, οι τεχνικές χρώσης διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην ενίσχυση της αντίθεσης των μικροσκοπικών εικόνων διαφόρων βιολογικών ιστών. Η χρώση Giemsa είναι χρήσιμη στη χρώση περιοχών DNA διαφορετικών χρωμοσωμάτων για τη διερεύνηση διαφορετικών εκτροπών όπως μετατοπίσεις και αναδιατάξεις. Η χρώση Leishman είναι χρήσιμη στη χρώση και την ανάλυση του επιχρίσματος αίματος για τη διαφοροποίηση και τον εντοπισμό τρυπανοσωμάτων, λευκοκυττάρων και παρασίτων ελονοσίας. Αυτή είναι λοιπόν η διαφορά μεταξύ του λεκέ Giemsa και του λεκέ Leishman.
