Βασική διαφορά – Gram Stain vs Culture
Η χρώση Gram είναι μια τεχνική χρώσης που εκτελείται για τη διαφοροποίηση των βακτηρίων σε δύο ομάδες ανάλογα με το πάχος της στιβάδας πεπτιδογλυκάνης στο κυτταρικό τους τοίχωμα. Η καλλιέργεια είναι μια μέθοδος ανάπτυξης και διατήρησης μικροοργανισμών σε εργαστηριακές συνθήκες για διαφορετικές αναλύσεις. Η βασική διαφορά μεταξύ του λεκέ σε γραμμάρια και της καλλιέργειας είναι η λειτουργία τους. στέλεχος gram μια τεχνική χρώσης βακτηρίων όπου η καλλιέργεια είναι μια μέθοδος ανάπτυξης και διατήρησης μικροοργανισμών.
Τι είναι Gram Stain;
Η χρώση Gram είναι μια σημαντική τεχνική διαφορικής χρώσης που χρησιμοποιείται για την ταυτοποίηση βακτηρίων στη Μικροβιολογία. Αυτή η τεχνική εισήχθη από τον Δανό βακτηριολόγο Hans Christian Gram το 1884. Η χρώση κατά Gram κατηγοριοποιεί τα βακτήρια σε δύο μεγάλες ομάδες: gram θετικά και gram αρνητικά. Αυτά είναι πολύ σημαντικά για την ταξινόμηση και την ταυτοποίηση των βακτηρίων. Η χρώση κατά Gram πραγματοποιείται ως αρχικό βήμα για τον χαρακτηρισμό των βακτηρίων.
Τα βακτήρια ομαδοποιούνται με βάση τις διαφορές στο κυτταρικό τους τοίχωμα. Τα θετικά κατά Gram βακτήρια περιέχουν ένα παχύ στρώμα πεπτιδογλυκάνης στο κυτταρικό τους τοίχωμα ενώ τα αρνητικά κατά Gram βακτήρια περιέχουν ένα λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης στο κυτταρικό τους τοίχωμα όπως φαίνεται στο σχήμα 01. Το αποτέλεσμα της χρώσης κατά gram θα βασίζεται στη διαφορά πάχους στο στρώμα πεπτιδογλυκάνης του κυτταρικό τοίχωμα.
Εικόνα 1: Gram θετικά βακτήρια και Gram αρνητικά βακτήρια
Η χρώση σε γραμμάρια πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας τέσσερα διαφορετικά αντιδραστήρια και συγκεκριμένα. πρωτεύον λεκέ, μυρωδάτο, αποχρωματιστικό και αντιλεκέ. Η κρυσταλλική βιολέτα και η σαφρανίνη χρησιμεύουν ως οι πρωταρχικοί και αντισταθμιστικοί λεκέδες, αντίστοιχα, ενώ τα γραμμάρια ιωδίου και 95% αλκοόλ χρησιμεύουν ως μυρωδάτο και αποχρωματιστικό, αντίστοιχα.
Βασικά βήματα της χρώσης γραμμαρίων
- Ένα βακτηριακό επίχρισμα παρασκευάζεται σε μια καθαρή γυάλινη πλάκα, σταθεροποιείται θερμικά και ψύχεται.
- Το επίχρισμα πλημμυρίζει με κρυσταλλική βιολέτα για 1 – 2 λεπτά.
- Το επίχρισμα ξεπλένεται με αργό τρεχούμενο νερό βρύσης για να αφαιρεθούν οι υπερβολικοί λεκέδες.
- Γραμάρια ιωδίου εφαρμόζεται στο επίχρισμα για 1 λεπτό.
- Το επίχρισμα ξεπλένεται με αργό τρεχούμενο νερό βρύσης
- Το επίχρισμα πλένεται με 95% οινόπνευμα για 2 – 5 δευτερόλεπτα και ξεπλένεται με αργό τρεχούμενο νερό βρύσης.
- Το επίχρισμα βάφεται αντίθετα με σαφρανίνη για 1 λεπτό
- Το επίχρισμα ξεπλένεται με αργό τρεχούμενο νερό βρύσης, στεγνώνει και παρατηρείται στο μικροσκόπιο.
Στο τέλος της χρώσης gram, τα αρνητικά κατά gram βακτήρια θα παρατηρηθούν σε ροζ χρώμα, ενώ τα θετικά κατά γραμμάρια βακτήρια θα παρατηρηθούν σε μωβ χρώμα όπως φαίνεται στην Εικόνα 02. Το αποτέλεσμα της χρώσης σε γραμμάρια καθορίζεται από το πάχος του στρώματος της πεπτιδογλυκάνης στο κυτταρικό τους τοίχωμα. Κατά τη διάρκεια του σταδίου αποχρωματισμού, ο πρωταρχικός λεκές και το μυρωδικό αφαιρούνται εύκολα από τα gram αρνητικά βακτήρια και γίνονται άχρωμα αφού έχουν ένα λεπτό στρώμα πεπτιδογλυκάνης. Η κύρια κηλίδα διατηρείται στα θετικά κατά γραμμάρια βακτήρια, καθώς έχουν ένα παχύ στρώμα πεπτιδογλυκάνης. Η αντίθετη χρώση δεν θα είναι αποτελεσματική για τα θετικά κατά γραμμάρια βακτήρια λόγω της διατήρησης της κύριας κηλίδας. Έτσι τα θετικά κατά γραμμάρια βακτήρια θα είναι ορατά στο πρωτεύον χρώμα λεκέ, δηλαδή στο μωβ χρώμα. Η αντίθετη κηλίδα θα λερώσει τα αρνητικά κατά gram βακτήρια και θα είναι ορατή στο χρώμα της επιλογής που είναι το χρώμα της σαφρανίνης. Ως εκ τούτου, είναι εύκολο να κατηγοριοποιηθούν τα βακτήρια σε δύο ομάδες με βάση τη χρώση gram και είναι πολύτιμο στη βακτηριακή διαφοροποίηση και αναγνώριση.
Εικόνα 2: Στέλεχος γραμμαρίου
Τι είναι Πολιτισμός;
Η μικροβιακή καλλιέργεια είναι μια μέθοδος καλλιέργειας και διατήρησης μικροοργανισμών σε εργαστηριακές συνθήκες για διαφορετικούς σκοπούς. Οι καλλιέργειες αναπτύσσονται σε στερεά, ημιστερεά και υγρά μέσα με βάση τον τύπο και το σκοπό της καλλιέργειας του μικροοργανισμού. Οι καλλιέργειες παρέχονται με τα απαραίτητα θρεπτικά συστατικά και τις συνθήκες ανάπτυξης που απαιτούνται από τους μικροοργανισμούς. Υπάρχουν διαφορετικά συστατικά ενός μέσου καλλιέργειας, όπως πηγή ενέργειας, πηγή άνθρακα, πηγή αζώτου, μέταλλα, μικροθρεπτικά συστατικά, νερό, στερεοποιητικός παράγοντας κ.λπ. Η βέλτιστη θερμοκρασία, το οξυγόνο και το pH πρέπει να ρυθμίζονται ανάλογα με τον τύπο του μικροοργανισμού που αναπτύσσεται.
Υπάρχουν διαφορετικοί τύποι μικροβιακών καλλιεργειών. για παράδειγμα, καλλιέργεια κατά παρτίδες, συνεχής καλλιέργεια, καλλιέργεια μαχαιρώματος, καλλιέργεια σε πλάκα άγαρ, καλλιέργεια ζωμού κ.λπ. Σύμφωνα με τη σύνθεση του καλλιεργητικού μέσου, υπάρχουν διάφοροι τύποι μέσων καλλιέργειας γνωστά ως συνθετικά μέσα, ημι-συνθετικά μέσα και φυσικά μέσα. Οι μικροβιακές καλλιέργειες παρασκευάζονται υπό στείρες συνθήκες μέσα σε έναν ειδικό θάλαμο που ονομάζεται στρωτή ροή αέρα. Το μέσο ανάπτυξης και τα γυάλινα σκεύη αποστειρώνονται πριν από τον εμβολιασμό του επιθυμητού μικροοργανισμού. Κάτω από κατάλληλες στείρες συνθήκες, ο μικροοργανισμός στόχος μεταφέρεται στο αποστειρωμένο θρεπτικό μέσο και επωάζεται στη βέλτιστη θερμοκρασία. Μέσα στο μέσο, ο μικροοργανισμός θα αναπτυχθεί και θα πολλαπλασιαστεί χρησιμοποιώντας τα παρεχόμενα θρεπτικά συστατικά.
Εικόνα 3: Μια βακτηριακή καλλιέργεια σε πλάκα
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ Gram Stain και Culture;
Gram Stain vs Culture |
|
| Το στέλεχος Grams είναι μια τεχνική διαφορικής χρώσης που χρησιμοποιείται για τη διαφοροποίηση και την ταυτοποίηση βακτηρίων. | Η μικροβιακή καλλιέργεια είναι μια μέθοδος ανάπτυξης μικροοργανισμών στο εργαστήριο. |
| Στοιχεία | |
| Αυτό χρησιμοποιεί διαφορετικά αντιδραστήρια συμπεριλαμβανομένων δύο λεκέδων. | Αυτό χρησιμοποιεί διαφορετικά μέσα καλλιέργειας, όπως στερεά, ημιστερεά και υγρά μέσα που αποτελούνται από θρεπτικά συστατικά και άλλες απαραίτητες συνθήκες. |
| Βασικές συναρτήσεις | |
| Αυτό επιτρέπει την ομαδοποίηση των βακτηρίων σε δύο ομάδες: γραμμάρια αρνητικά και γραμμάρια θετικά. | Αυτό επιτρέπει τον πολλαπλασιασμό μικροοργανισμών για διαφορετικούς σκοπούς. |
| Βάση | |
| Το αποτέλεσμα χρώσης γραμμαρίων βασίζεται στις διαφορές στο στρώμα πεπτιδογλυκάνης του κυτταρικού τοιχώματος. | Οι μικροοργανισμοί θα αναπτυχθούν και θα πολλαπλασιαστούν μέσα στα μέσα καλλιέργειας. |
| Έκβαση | |
| Τα αρνητικά κατά γραμμάρια βακτήρια είναι ορατά σε ροζ χρώμα και τα θετικά σε γραμμάρια βακτήρια είναι ορατά με μωβ χρώμα. | Σε πλάκες, διακρίνονται αποικίες των μικροοργανισμών. Σε υγρά μέσα, οι μικροοργανισμοί βρίσκονται σε αιωρούμενη μορφή. |
Σύνοψη – Gram Stain vs Culture
Οι μικροβιακές καλλιέργειες παρασκευάζονται και διατηρούνται σε εργαστηριακές συνθήκες για διαφορετικούς σκοπούς, όπως αποθήκευση, δοκιμή, χημικός καθαρισμός, κ.λπ. Η χρώση με γραμμάρια είναι μια διαδικασία χρώσης που διαφοροποιεί τα βακτήρια σε δύο κύριες ομάδες που ονομάζονται αρνητικά κατά gram και βακτήρια θετικά κατά gram. Επομένως, η διαφορά μεταξύ της χρώσης σε γραμμάρια και της καλλιέργειας είναι ότι η χρώση με γραμμάρια είναι μια τεχνική χρώσης βακτηρίων ενώ η καλλιέργεια είναι μια μέθοδος ανάπτυξης και διατήρησης μικροοργανισμών στα εργαστήρια.
