Βασική διαφορά – CFU vs MPN
Μονάδα σχηματισμού αποικιών (CFU) και Πιο πιθανός αριθμός (MPN) είναι δύο μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για την απαρίθμηση μικροοργανισμών στα δείγματα. Και οι δύο παράμετροι χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση της ποιότητας του νερού και των βακτηρίων δείκτη κοπράνων σε δείγματα νερού. Η μονάδα σχηματισμού αποικίας είναι ένα μέτρο που χρησιμοποιείται για την απαρίθμηση του αριθμού βιώσιμων βακτηριακών κυττάρων ή κυττάρων μυκήτων σε συγκεκριμένο όγκο ή βάρος ενός δεδομένου δείγματος. Η τυπική μονάδα για αυτήν την παράμετρο είναι CFU/ml ή CFU/g. Ο πιο πιθανός αριθμός είναι μια άλλη μονάδα που χρησιμοποιείται για τη μέτρηση του αριθμού των βιώσιμων βακτηριακών κυττάρων σε ένα υγρό δείγμα. Η βασική διαφορά μεταξύ CFU και MPN είναι ότι το CFU υπολογίζεται από τις αποικίες βακτηρίων και μυκήτων που αναπτύσσονται σε μια πλάκα στερεού άγαρ ενώ το MPN υπολογίζεται από βιώσιμα βακτήρια που αναπτύσσονται σε υγρό μέσο.
Τι είναι η CFU;
Μονάδα σχηματισμού αποικιών (CFU) είναι μια παράμετρος που μετρά τον αριθμό των βιώσιμων βακτηριακών ή μυκητιακών κυττάρων σε ένα δεδομένο δείγμα. Η μέθοδος που μετράει τις μονάδες σχηματισμού αποικιών αναφέρεται ως τυπική μέτρηση πλακών. Οι βιώσιμες αποικίες που εμφανίζονται στις πλάκες άγαρ εκφράζονται ως CFU ανά 1 ml (μονάδα σχηματισμού αποικίας ανά χιλιοστόλιτρο) του δείγματος για υγρά ή CFU ανά 1 g (μονάδα σχηματισμού αποικίας ανά γραμμάριο) του δείγματος για στερεά.
Υπάρχουν δύο συνήθεις μέθοδοι που χρησιμοποιούνται για τη μέτρηση της CFU σε ένα δείγμα. Είναι μέθοδος πλάκας απλώματος και μέθοδος πλάκας έκχυσης. Αυτές οι δύο μέθοδοι υποστηρίζονται από μια τεχνική που ονομάζεται σειριακή αραίωση. Τα σειριακά αραιωμένα δείγματα επιτρέπουν τη λήψη ενός μετρήσιμου αριθμού αποικιών στην επιφάνεια του άγαρ. Ένας γνωστός όγκος δείγματος μπορεί να απλωθεί στην επιφάνεια μιας πλάκας άγαρ ή να αναμιχθεί με άγαρ και να χυθεί σε μια πλάκα. Η πλάκα στη συνέχεια επωάζεται και μετρώνται οι προκύπτουσες αποικίες. Ο αριθμός των αποικιών σχετίζεται με τον αριθμό των μικροοργανισμών στο αρχικό δείγμα. Οι πλάκες που εμφανίζουν πάρα πολλές αποικίες ή πολύ λίγες αποικίες αποκλείονται από την καταμέτρηση επειδή τα αποτελέσματα ενδέχεται να μην είναι στατιστικά ακριβή σε αυτές τις πλάκες. Στατιστικά, το καλύτερο εύρος είναι 30 – 300 αποικίες σε μια πλάκα άγαρ. Ως εκ τούτου, οι σωστές πλάκες πρέπει να επιλέγονται για ακριβή απαρίθμηση. Εκτελείται σειριακή αραίωση για την παραπάνω λειτουργία.
Μόλις μετρήσετε τον αριθμό των βιώσιμων αποικιών σε πλάκες, η CFU/ml μπορεί να υπολογιστεί χρησιμοποιώντας την ακόλουθη εξίσωση.
CFU ανά ml αρχικού δείγματος=αριθμός αποικιών σε ένα πιάτο X παράγοντας αραίωσης
Συντελεστής αραίωσης=(1/ Αραίωση της πλάκας)
Για παράδειγμα, εάν λάβετε 149 αποικίες στο πιάτο της αραίωσης 10-4, τότε ο αριθμός των βακτηρίων σε 1 ml του αρχικού δείγματος μπορεί να υπολογιστεί ως εξής:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 ή 1490000
=1. 49 x 106
Εικόνα 01: Μονάδα σχηματισμού αποικιών
Τι είναι το MPN;
Ο πιο πιθανός αριθμός είναι ένα εναλλακτικό μέτρο αντί της CFU/ml. Το MPN εκτιμά επίσης τα βιώσιμα κύτταρα σε ένα υγρό δείγμα. Μετρά τους οργανισμούς που αναπτύσσονται σε υγρή καλλιέργεια και είναι μια κυρίως βακτηριολογική τεχνική. Αυτή η μέθοδος είναι ιδιαίτερα χρήσιμη για δείγματα που περιέχουν χαμηλές συγκεντρώσεις βακτηριακών κυττάρων. για παράδειγμα, γάλα, πόσιμο νερό κ.λπ. Η τιμή MPN εκφράζεται για 100 ml όγκου. Το MPN βασίζεται σε μια στατιστική μέθοδο που βασίζεται στη θεωρία πιθανοτήτων. Υπάρχουν στατιστικοί πίνακες που έχουν σχεδιαστεί για την εύρεση τιμών MPN ανά 100 ml του δείγματος. Αυτοί οι πίνακες δείχνουν τα αποτελέσματα σε όρια εμπιστοσύνης 95%.
Η τιμή MPN υπολογίζεται μετά την εκτέλεση μιας τεχνικής που ονομάζεται μέθοδος ζύμωσης πολλαπλών σωλήνων. Τρεις σετ σωληναρίων που περιέχουν κατάλληλο μέσο καλλιέργειας εμβολιάζονται με τρεις διαφορετικούς όγκους του δείγματος όπως 10 ml, 1 ml και 0.1 ml και επωάζεται για την ανάπτυξη. Μετά την περίοδο επώασης, οι σωλήνες βαθμολογούνται με + (θετικό) ή - (αρνητικό) για την παρουσία ή την απουσία ανάπτυξης. Το μοτίβο των θετικών και αρνητικών αποτελεσμάτων συγκρίνεται στη συνέχεια με έναν πίνακα MPN στατιστικών πιθανοτήτων για να εκτιμηθεί ο αριθμός των μικροοργανισμών. Στη συνέχεια δίνεται τιμή MPN για 100 ml του δείγματος. Το MPN χρησιμοποιείται ευρέως για την ανίχνευση κολοβακτηριδίων που υπάρχουν σε δείγματα νερού.
Εικόνα 02: Πίνακας MPN
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ CFU και MPN;
CFU vs MPN |
|
| Το CFU είναι ένα μέτρο που χρησιμοποιείται για την έκφραση του αριθμού βιώσιμων βακτηριακών ή μυκητιακών αποικιών σε ένα δεδομένο δείγμα. | Το MPN είναι ένα εναλλακτικό μέτρο για την CFU και μετρά τον αριθμό των βιώσιμων βακτηριακών κυττάρων σε ένα υγρό δείγμα. |
| Μονάδα | |
| CFU/ml ή CFU/g | MPN/100 ml |
| Υπολογισμός | |
| Το CFU υπολογίζεται μετρώντας τον αριθμό των αποικιών που αναπτύσσονται σε πλάκες άγαρ. | Το MPN υπολογίζεται συγκρίνοντας θετικά και αρνητικά σχέδια των σωλήνων με τον στατιστικό πίνακα MPN. |
| Τεχνική σειριακής αραίωσης | |
| Γίνεται σειριακή αραίωση πριν από την τοποθέτηση των δειγμάτων σε πλάκες άγαρ. | Η σειριακή αραίωση δεν εκτελείται συνήθως όταν υπολογίζεται το MPN |
| Μέθοδοι | |
| Η μέθοδος πλάκας απλώσεως και η μέθοδος πλάκας έκχυσης είναι δύο τύποι μεθόδων που εκτελούνται για τη λήψη CFU. | Η ζύμωση πολλαπλών σωλήνων είναι η μέθοδος που εκτελείται για να ληφθεί η τιμή MPN. |
Σύνοψη – CFU vs MPN
Η μέτρηση της μικροβιακής ανάπτυξης απαιτείται για πολλούς λόγους. Στις μονάδες επεξεργασίας τροφίμων, είναι απαραίτητο να μετρηθεί το επίπεδο & το είδος των μικροοργανισμών στα τρόφιμα. Στη βιομηχανία τροφίμων και την ιατρική, είναι απαραίτητο να διασφαλιστεί ότι οι θεραπείες αποστείρωσης εφαρμόζονται αποτελεσματικά. Στις εγκαταστάσεις επεξεργασίας λυμάτων, απαιτείται τακτική λήψη μικροβιακών μετρήσεων. Κατά τη βελτιστοποίηση της διαδικασίας στη μοριακή βιολογία, απαιτείται η μέτρηση του αριθμού των αποικιών στις πλάκες. Ως εκ τούτου, υπάρχουν διαθέσιμες διαφορετικές μέθοδοι απαρίθμησης και μέτρησης ανάπτυξης. Η CFU και η MPN είναι δύο τέτοιες μέθοδοι που υιοθετούνται ευρέως σε διάφορους τομείς. Το CFU είναι ένα μέτρο του αριθμού των βιώσιμων βακτηριακών και μυκητιακών αποικιών που υπάρχουν σε ένα δεδομένο δείγμα. Υπολογίζεται χρησιμοποιώντας την τυπική μέθοδο μέτρησης πλακών ή τη μέθοδο βιώσιμης μέτρησης πλακών. Το MPN είναι ένα άλλο μέτρο που εκφράζει τον αριθμό των βακτηριακών κυττάρων που υπάρχουν σε έναν δεδομένο όγκο του υγρού δείγματος. Υπολογίζεται χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ζύμωσης πολλαπλών σωλήνων και τον πίνακα MPN. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ CFU και MPN.
Λήψη έκδοσης PDF του CFU έναντι MPN
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να τη χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τις σημειώσεις παραπομπών. Κάντε λήψη της έκδοσης PDF εδώ Διαφορά μεταξύ CFU και MPN.
