Η βασική διαφορά μεταξύ της ανάλυσης bradford και της ανάλυσης πρωτεΐνης lowry είναι ότι η ανάλυση πρωτεΐνης Bradford βασίζεται στη μετατόπιση απορρόφησης της χρωστικής Coomassie brilliant blue G-250 ενώ η ανάλυση πρωτεΐνης Lowry βασίζεται στην αντίδραση ιόντων χαλκού (Cu+) παράγεται από την οξείδωση πεπτιδικών δεσμών με αντιδραστήριο Folin–Cioc alteu.
Η ανάλυση είναι μια αναλυτική τεχνική που βοηθά στον χαρακτηρισμό των κύριων λειτουργικών συστατικών ενός δείγματος. Ως εκ τούτου, ένας προσδιορισμός θα μπορούσε να είναι είτε ποιοτικός είτε ποσοτικός έλεγχος. Πολλοί τομείς, συμπεριλαμβανομένης της εργαστηριακής ιατρικής, της φαρμακολογίας, της περιβαλλοντικής βιολογίας, της μοριακής βιολογίας, της βιοχημείας και της ανοσολογίας χρησιμοποιούν αυτού του είδους τις αναλύσεις συστηματικά. Η δοκιμασία πρωτεΐνης Bradford και Lowry είναι δύο βιοχημικές δοκιμασίες που καθορίζουν τη συγκέντρωση πρωτεΐνης σε διάλυμα δείγματος. Και οι δύο δοκιμασίες χρησιμοποιούν χρωματομετρικές τεχνικές για την παροχή αποτελεσμάτων.
Τι είναι ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford;
Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford είναι μια ταχεία φασματοσκοπική αναλυτική διαδικασία για ανάλυση πρωτεϊνών. Δείχνει υψηλή ακρίβεια κατά τη μέτρηση της συγκέντρωσης πρωτεΐνης σε ένα διάλυμα. Η Marion Bradford εισήγαγε αυτή τη διαδικασία το 1976. Σε αυτή τη δοκιμασία, η συνολική αντίδραση βασίζεται στη σύνθεση αμινοξέων των πρωτεϊνών που μετρήθηκαν. Με άλλους όρους, ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford είναι ένας χρωματομετρικός προσδιορισμός. Χρησιμοποιεί τη βαφή Coomassie brilliant blue. Ως εκ τούτου, αυτή η χρωματομετρική δοκιμασία πρωτεΐνης εξαρτάται από τη μετατόπιση απορρόφησης της χρωστικής. Το Coomassie brilliant blue G-250 υπάρχει σε τρεις μορφές: κατιονικό (κόκκινο), ανιονικό (μπλε) και ουδέτερο (πράσινο). Κατά τη διάρκεια όξινων συνθηκών, η κόκκινη μορφή της βαφής μετατρέπεται σε μπλε. Επιβεβαιώνει τη δέσμευση της πρωτεΐνης. Εάν η πρωτεΐνη δεν υπάρχει, το διάλυμα μπορεί να παραμείνει σε καφέ χρώμα.
Εικόνα 01: Δοκιμασία πρωτεΐνης Bradford
Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford διαφέρει από άλλους προσδιορισμούς πρωτεΐνης, καθώς είναι λιγότερο ευαίσθητος σε παρεμβολές διαφόρων χημικών ενώσεων που υπάρχουν στο διάλυμα πρωτεΐνης. Αυτές οι ενώσεις περιλαμβάνουν νάτριο, κάλιο, γλυκόζη και σακχαρόζη κ.λπ.
Τι είναι η δοκιμασία πρωτεΐνης Lowry;
Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Lowry είναι ένας βιοχημικός προσδιορισμός που χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό του συνολικού επιπέδου πρωτεΐνης σε ένα διάλυμα. Ο Oliver H. Lowry είναι το άτομο που ανέπτυξε αυτό το αντιδραστήριο το 1940. Η διαδικασία απεικονίζει τη συνολική συγκέντρωση πρωτεΐνης του διαλύματος με μια αλλαγή χρώματος που είναι ανάλογη με τη συγκέντρωση πρωτεΐνης στο διάλυμα. Ως εκ τούτου, αυτή είναι επίσης μια χρωματομετρική δοκιμασία πρωτεΐνης.
Η αντίδραση μεταξύ των ιόντων χαλκού (Cu+) που παράγονται από την οξείδωση των πεπτιδικών δεσμών και του αντιδραστηρίου Folin–Cioc alteu είναι η βάση αυτής της διαδικασίας. Επίσης, αυτό το αντιδραστήριο περιέχει φωσφομολυβδικό οξύ και φωσφοροβολφραμικό οξύ. Ωστόσο, ο μηχανισμός αντίδρασης της δοκιμασίας πρωτεΐνης Lowry δεν είναι καλά κατανοητός. Αλλά περιλαμβάνει την οξείδωση των υπολειμμάτων κυστεΐνης, τρυπτοφάνης και τυροσίνης με τη μείωση του αντιδραστηρίου Folin-Cioc alteu.
Εικόνα 02: Δοκιμασία πρωτεΐνης Lowry
Τα υπολείμματα κυστεΐνης συμβάλλουν στην απορρόφηση που παρατηρείται στον προσδιορισμό πρωτεΐνης Lowry και η αντίδραση καταλήγει σε ένα λαμπρό μπλε μόριο. ετεροπωλιακό μπλε του μολυβδαινίου. Η αναγωγή αυτού του μορίου μετριέται με απορρόφηση στα 660 nm. Ως εκ τούτου, η συγκέντρωση των υπολειμμάτων κυστεΐνης και τρυπτοφάνης που μείωσαν το αντιδραστήριο Folin-Cioc alteu συνάγει τη συνολική συγκέντρωση της πρωτεΐνης στο διάλυμα.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry;
- Οι δοκιμές πρωτεΐνης Bradford και Lowry προσδιορίζουν τη συγκέντρωση πρωτεΐνης σε ένα διάλυμα.
- Και οι δύο μέθοδοι είναι χρωματομετρικές μέθοδοι.
- Επίσης, η ευαισθησία και των δύο μεθόδων είναι υψηλή.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry;
Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford και Lowry είναι δύο τύποι αναλύσεων που καθορίζουν τη συγκέντρωση πρωτεΐνης σε ένα διάλυμα. Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford βασίζεται στη μετατόπιση απορρόφησης της χρωστικής Coomassie brilliant blue G-250 ενώ ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Lowry εξαρτάται από την αντίδραση των ιόντων χαλκού που παράγονται από την οξείδωση των πεπτιδικών δεσμών, με το αντιδραστήριο Folin-Cioc alteu. Έτσι, αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry. Ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford διαρκεί 15 λεπτά για να δώσει ένα αποτέλεσμα, ενώ ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Lowery χρειάζεται 40-60 λεπτά για να δώσει ένα αποτέλεσμα. Έτσι, αυτή είναι μια άλλη διαφορά μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry. Επιπλέον, ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Bradford εξαρτάται από τη σύνθεση αμινοξέων ενώ ο προσδιορισμός πρωτεΐνης Lowry εξαρτάται εν μέρει από τη σύνθεση αμινοξέων. Ως εκ τούτου, αυτή είναι επίσης μια διαφορά μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry.
Το Το παρακάτω inforaphic παρέχει περισσότερες λεπτομέρειες σχετικά με τη διαφορά μεταξύ της ανάλυσης πρωτεΐνης Bradford και Lowry.
Σύνοψη – Δοκιμασία πρωτεΐνης Bradford εναντίον Lowry
Μια ανάλυση είναι μια αναλυτική τεχνική που χρησιμοποιείται για τον χαρακτηρισμό του κύριου λειτουργικού συστατικού ενός δείγματος. Η δοκιμασία πρωτεΐνης Bradford και Lowry είναι δύο τύποι δοκιμασιών πρωτεΐνης που λειτουργούν με χρωματομετρικές τεχνικές. Και οι δύο δοκιμές πρωτεΐνης Bradford και Lowry προσδιορίζουν τη συγκέντρωση πρωτεΐνης σε ένα διάλυμα. Ωστόσο, η βασική διαφορά μεταξύ του Bradford και του Lowry Protein Assay έγκειται στη χρωματομετρική τεχνική που χρησιμοποιούν. Η δοκιμασία πρωτεΐνης Bradford χρησιμοποιεί το Coomassie brilliant blue G-250 ενώ η δοκιμασία πρωτεΐνης Lowry χρησιμοποιεί ιόντα χαλκού (Cu+) και αντιδραστήριο Folin–Cioc alteu. Επιπλέον, η μέθοδος Bradford δίνει γρήγορα αποτελέσματα από την ανάλυση πρωτεΐνης Lowry. Ωστόσο, και οι δύο μέθοδοι είναι μέθοδοι υψηλής ευαισθησίας και υπόκεινται σε παρεμβολές από διάφορες ουσίες.
