Βασική διαφορά – DMEM vs EMEM
Η καλλιέργεια ζωικών κυττάρων πραγματοποιείται για τη διατήρηση ζωικών κυτταρικών σειρών προκειμένου να διεξαχθούν πολλές ερευνητικές δραστηριότητες. Οι κυτταρικές σειρές ζώων διατηρούνται υπό στείρες συνθήκες και απαιτούν ειδικές τεχνικές. Χρησιμοποιούνται σε μελέτες σχετικά με την παραγωγή εμβολίων, για τον προσδιορισμό της συμπεριφοράς του κυττάρου σε καρκινογόνους και μεταλλαξιογόνους παράγοντες και στην έρευνα για τον καρκίνο. Τα μέσα κυτταρικής καλλιέργειας είναι πολύ σημαντικά για την επιτυχία της καλλιέργειας ζωικών κυττάρων. Υπάρχουν διάφοροι τύποι μέσων κυτταροκαλλιέργειας όπως το Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) και το Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM). Το DMEM είναι ένα τροποποιημένο βασικό μέσο με αυξημένες συγκεντρώσεις αμινοξέων και βιταμινών έως και τέσσερις φορές. Αυτό περιλαμβάνει επίσης μερικές ακόμη υποκαταστάσεις που αυξάνουν τις θρεπτικές συνθήκες των μέσων. Το EMEM είναι ένας από τους πρώτους τύπους μέσων καλλιέργειας ζωικών κυττάρων που αναπτύχθηκε από τον Harry Eagle. Είναι ένα απλό, βασικό μέσο με τις ελάχιστες ποσότητες θρεπτικών συνθέσεων. Η βασική διαφορά μεταξύ δύο μέσων είναι η σύνθεση των θρεπτικών συστατικών. Το EMEM αποτελείται από τις ελάχιστες συγκεντρώσεις θρεπτικών ουσιών που απαιτούνται για την ανάπτυξη της καλλιέργειας, ενώ το DMEM είναι ένα πολύ περίπλοκο μέσο με αυξημένες συγκεντρώσεις αμινοξέων και βιταμινών.
Τι είναι το DMEM;
Το Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) είναι ένας τροποποιημένος τύπος μέσων που παρασκευάζεται στο εμπόριο ως κρεμώδης λευκή σκόνη. Αυτό είναι προσαρμοσμένο από το EMEM και η θρεπτική σύνθεση τροποποιείται αυξάνοντας τη συγκέντρωση αμινοξέων και βιταμινών. Η συγκέντρωση των αμινοξέων αυξάνεται έως και δύο φορές σε σύγκριση με το βασικό μέσο. Η συγκέντρωση της βιταμίνης αυξάνεται έως και τέσσερις φορές αυξάνοντας έτσι την περιεκτικότητα σε θρεπτικά συστατικά στο μέσο.
Το DMEM τροποποιείται επίσης με την προσθήκη περισσότερων αλάτων όπως ο νιτρικός σίδηρος, το πυροσταφυλικό νάτριο και ορισμένα μη απαραίτητα αμινοξέα όπως η σερίνη και η γλυκίνη. Η συγκέντρωση της γλυκόζης στα μέσα μεταβάλλεται επίσης. Η αρχική σύνθεση αποτελείται από 1000 mg/L γλυκόζης, ενώ στο DMEM, η συγκέντρωση αυξάνεται έως και 4500 mg/L. Το DMEM απαιτεί επίσης συμπλήρωμα ενός μέσου ορού καθώς δεν είναι πλήρες μέσο. Τις περισσότερες φορές, το DMEM συμπληρώνεται με ορό εμβρύου βοοειδών (FBS). Το FBS παρέχει τις απαιτούμενες πρωτεΐνες και αυξητικούς παράγοντες για τη διαδικασία καλλιέργειας.
Το pH του μέσου ποικίλλει κατά την προσθήκη διττανθρακικού νατρίου. Το pH του μέσου πριν από την προσθήκη διττανθρακικού νατρίου είναι περίπου 6,80 – 7,40, ενώ το pH, μετά την προσθήκη διττανθρακικού νατρίου κυμαίνεται από 7,60 – 8,20. Η θερμοκρασία αποθήκευσης των μέσων είναι 2 – 8 0C.
Εικόνα 01: DMEM
Εφαρμογές του DMEM
- Για τη μελέτη της ικανότητας σχηματισμού πλάκας του ιού πολυομώματος σε εμβρυϊκά κύτταρα ποντικού.
- Σε μελέτες αναστολής επαφής
- Σε καλλιέργειες κυττάρων κοτόπουλου
Τι είναι το EMEM;
Το Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) είναι ένα από τα πρώτα ανεπτυγμένα μέσα στην κυτταρική καλλιέργεια ζωικών κυτταρικών σειρών. Οι πρώτοι τύποι ζωικών κυτταρικών γραμμών που αναπτύχθηκαν χρησιμοποιώντας ΕΜΕΜ περιλαμβάνουν κύτταρα L ποντικού και κύτταρα HeLa. Τα μέσα ΕΜΕΜ είναι επίσης ένας τύπος τροποποιημένων μέσων. Ο Harry Eagle διατύπωσε για πρώτη φορά το μέσο ΕΜΕΜ. Τα μέσα ΕΜΕΜ περιλάμβαναν τα απαραίτητα αμινοξέα και βιταμίνες σε ελάχιστη συγκέντρωση που απαιτείται από τους τύπους κυττάρων. Τα μη απαραίτητα αμινοξέα δεν συμπεριλήφθηκαν στο σκεύασμα και οι συγκεντρώσεις γλυκόζης και διττανθρακικού νατρίου μειώνονται. Αν και τα μέσα περιείχαν την ισορροπημένη ποσότητα ελάχιστων απαιτήσεων ανάπτυξης για την επιτυχή ανάπτυξη των κυττάρων.
Το EMEM δεν είναι πλήρες μέσο. Ως εκ τούτου, απαιτείται συμπλήρωση με ορό για την επιτυχή ανάπτυξη των κυττάρων των θηλαστικών. Το EMEM χρησιμοποιείται σε μεγάλη ποικιλία κυττάρων και εξακολουθεί να είναι ένα δημοφιλές μέσο μεταξύ των ερευνητών κυτταροκαλλιέργειας.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ DMEM και EMEM;
- Και οι δύο τύποι μέσων χρησιμοποιούνται σε καλλιέργειες ζωικών κυττάρων.
- Και οι δύο τύποι μέσων είναι υγρές συνθέσεις.
- Και οι δύο τύποι μέσων είναι τροποποιημένα μέσα από τα βασικά μέσα.
- Και οι δύο τύποι μέσων περιέχουν τα απαραίτητα αμινοξέα, βιταμίνες και ανόργανα άλατα που απαιτούνται για την ανάπτυξη.
- Και οι δύο τύποι μέσων δεν είναι ολοκληρωμένοι. Επομένως, πρέπει να προστεθεί ορός.
- Και οι δύο τύποι μέσων χρησιμοποιούν γλυκόζη ως πηγή άνθρακα.
- Και οι δύο τύποι μέσων έχουν υψηλότερο pH και ρυθμίζονται με την προσθήκη διττανθρακικού νατρίου.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ DMEM και EMEM;
DMEM εναντίον EMEM |
|
| Το DMEM είναι ένας τροποποιημένος τύπος βασικού μέσου, με αυξημένες συγκεντρώσεις αμινοξέων και βιταμινών. Αυτό περιλαμβάνει επίσης μερικές ακόμη υποκαταστάσεις που αυξάνουν τις θρεπτικές συνθήκες των μέσων. | Το EMEM είναι ένας από τους πρώτους τύπους μέσων καλλιέργειας ζωικών κυττάρων που αναπτύχθηκε από τον Harry Eagle. Είναι ένα απλό, βασικό μέσο με τις ελάχιστες ποσότητες θρεπτικών συνθέσεων. |
| Τροποποιήσεις του αμινοξέος | |
| Η συγκέντρωση αμινοξέων έχει αυξηθεί έως και δύο φορές στο μέσο DMEM. | Ελάχιστη συγκέντρωση αμινοξέος χρησιμοποιείται στο ΕΜΕΜ. |
| Τροποποιήσεις βιταμινών | |
| Η συγκέντρωση της βιταμίνης έχει αυξηθεί έως και τέσσερις φορές στο DMEM. | Ελάχιστη συγκέντρωση βιταμινών χρησιμοποιείται στο ΕΜΕΜ. |
| Συγκέντρωση γλυκόζης | |
| Η συγκέντρωση γλυκόζης έχει αυξηθεί έως και 4500 mg/L σε DMEM. | Η συγκέντρωση γλυκόζης είναι 1000 mg/L σε ΕΜΕΜ. |
| Παρουσία μη βασικών αμινοξέων | |
| Παρουσία στο DMEM. | Απών στο ΕΜΕΜ. |
| Παρουσία πρόσθετων στοιχείων | |
| Συστατικά όπως ο νιτρικός σίδηρος, το πυροσταφυλικό νάτριο υπάρχουν στο DMEM. | Το EMEM περιέχει την ελάχιστη ποσότητα θρεπτικών συστατικών. |
Σύνοψη – DMEM vs EMEM
Το DMEM και EMEM είναι δύο δημοφιλή μέσα καλλιέργειας ζωικών κυττάρων που διαφέρουν κυρίως στις θρεπτικές τους συνθέσεις. Το DMEM είναι τροποποιημένη μορφή του EMEM, όπου οι συγκεντρώσεις θρεπτικών συστατικών αυξάνονται μαζί με την προσθήκη ορισμένων νέων συστατικών. Το ΕΜΕΜ είναι ένα ελάχιστο μέσο και περιέχει όλους τους βασικούς παράγοντες που απαιτούνται για την επιτυχή ανάπτυξη των ζωικών κυτταρικών σειρών. Αυτά τα μέσα θα πρέπει να χρησιμοποιούνται υπό συνθήκες υψηλής αποστείρωσης και και τα δύο μέσα θα πρέπει να συμπληρώνονται με τον ορό πριν από τη χρήση. Αυτή είναι η διαφορά μεταξύ DMEM και EMEM.
Λήψη του PDF του DMEM vs EMEM
Μπορείτε να κατεβάσετε την έκδοση PDF αυτού του άρθρου και να τη χρησιμοποιήσετε για σκοπούς εκτός σύνδεσης σύμφωνα με τη σημείωση παραπομπής. Κάντε λήψη της έκδοσης PDF εδώ Διαφορά μεταξύ DMEM και EMEM
