Η βασική διαφορά μεταξύ CLIA και ECLIA είναι ότι το CLIA χρησιμοποιεί μια χημική μέθοδο για τη δημιουργία χημειοφωταύγειας ενώ η ECLIA χρησιμοποιεί μια ηλεκτροχημική μέθοδο για τη δημιουργία σημάτων χημειοφωταύγειας στην τεχνική ανοσοδοκιμασίας.
Οι ανοσοδοκιμασίες χρησιμοποιούνται ευρέως για την ταυτοποίηση και τον ποσοτικό προσδιορισμό πρωτεϊνών που σχετίζονται με ασθένειες ή λοιμώξεις. Επομένως, βασίζονται κυρίως στην έννοια της δέσμευσης αντισώματος-αντιγόνου. Υπάρχουν πολλοί τύποι ανοσοδοκιμών και οι ανοσοδοκιμασίες χημειοφωταύγειας είναι μια τέτοια αναδυόμενη αναπτυξιακή τεχνική. Τόσο το CLIA όσο και το ECLIA χρησιμοποιούν δείκτες χημειοφωταύγειας.
Τι είναι το CLIA;
Η ανοσοδοκιμασία χημειοφωταύγειας (CLIA) είναι ένας τύπος ανοσοπροσδιορισμού που χρησιμοποιεί ένα φωταυγές μόριο για ανίχνευση. Η φωταύγεια που εκπέμπεται από το μόριο ανιχνεύεται στο φασματοφωτόμετρο, γενικά σε μήκος κύματος μεταξύ 300 – 800 nm. Η χημειοφωταύγεια προκαλεί διέγερση των ατόμων και η τεχνική προσδιορίζει τις εξεργογικές χημικές αντιδράσεις ως την καταλληλότερη πηγή ενέργειας για την παραγωγή διέγερσης.
Η τεχνική CLIA πραγματοποιείται με δύο κύριες μεθόδους, την τεχνική άμεσης CLIA και την έμμεση τεχνική CLIA. Η άμεση τεχνική CLIA χρησιμοποιεί δείκτες άμεσου φωτοφόρα που συνδέονται με τον στόχο, ενώ η έμμεση μέθοδος CLIA χρησιμοποιεί ενζυμικούς δείκτες. Οι άμεσοι δείκτες φωτοφόρα περιλαμβάνουν εστέρες οξέος και ρουθηνίου, ενώ οι έμμεσοι δείκτες περιλαμβάνουν αλκαλική φωσφατάση με υπόστρωμα αδαμαντυλ 1, 2-διοξετανικό αρυλφωσφορικό (AMPPD) και υπεροξειδάση χρένου με λουμινόλη ή τα παράγωγά της ως υπόστρωμα.
Εικόνα 01: Χημειοφωταύγεια
Τα βασικά πλεονεκτήματα του CLIA είναι το ευρύ δυναμικό εύρος λειτουργικότητας, η υψηλή ένταση στην παροχή σήματος, η απουσία παρεμβολών στο φόντο, η υψηλή ειδικότητα, η ταχύτητα, η σταθερότητα και η συμβατότητα με διαφορετικά πρωτόκολλα ανάλυσης. Αντίθετα, το υψηλό τους κόστος και οι περιορισμοί σε σχέση με την ανίχνευση αντιγόνου και τις δοκιμαστικές ομάδες είναι τα μειονεκτήματα του CLIA.
Τι είναι το ECLIA;
Η Ανοσοδοκιμασία Ηλεκτροχημειοφωταύγειας (ELCIA) είναι μια νέα τεχνική ανάπτυξης ανοσοδοκιμών που χρησιμοποιεί την έννοια της ηλεκτροχημιφωταύγειας. Στην έννοια της ηλεκτροφωταύγειας, τα ενδιάμεσα παράγουν ηλεκτροχημικά. Αυτά τα ηλεκτρονικά δημιουργούμενα ενδιάμεσα φτάνουν στη συνέχεια σε διεγερμένη κατάσταση και έχουν ως αποτέλεσμα την εκπομπή φωτός. Το μήκος κύματος στο οποίο εκπέμπεται το φως αντιστοιχεί στο ενεργειακό χάσμα. Έτσι, η χημειοφωταύγεια παράγεται λόγω του ότι ένα ή περισσότερα αντιδρώντα παράγονται ηλεκτροχημικά στο ηλεκτρόδιο.
Το ECLIA είναι μια χρήσιμη αναλυτική εφαρμογή με υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα. Χρησιμοποιείται κυρίως για τον εντοπισμό πρωτεϊνών που σχετίζονται με διαφορετικές παθολογικές και ιατρικές καταστάσεις. Τα βασικά πλεονεκτήματά του περιλαμβάνουν ευρύτερο δυναμικό εύρος, ευελιξία, χωρικό και χρονικό έλεγχο με την εφαρμογή δυναμικών ηλεκτροδίων, υψηλή ευαισθησία έως και picomolar εύρος. Ωστόσο, το γεγονός ότι απαιτεί χειρισμό από ειδικούς και το υψηλό κόστος που σχετίζεται είναι τα μειονεκτήματά του.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ CLIA και ECLIA;
- Και οι δύο τεχνικές βασίζονται στην έννοια της δέσμευσης αντιγόνου-αντισώματος.
- Επιπλέον, και τα δύο χρησιμοποιούνται κυρίως για τη διάγνωση ασθενειών με βάση τον ποσοτικό προσδιορισμό πρωτεϊνών.
- Και οι δύο είναι ευαίσθητες και συγκεκριμένες μέθοδοι κιτ.
- Χρησιμοποιούν την έννοια της χημειοφωταύγειας για ανίχνευση.
- Μπορούν να αυτοματοποιηθούν.
- Και τα δύο απαιτούν φασματοφωτόμετρο για ανίχνευση.
- Και τα δύο έχουν μεγάλο δυναμικό εύρος.
- Είναι δαπανηρές τεχνικές.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ CLIA και ECLIA;
Το CLIA είναι μια τεχνική ανοσοπροσδιορισμού που χρησιμοποιεί τη θεωρία της χημειοφωταύγειας, ενώ η ECLIA είναι μια τεχνική ανοσοδοκιμασίας που χρησιμοποιεί τη θεωρία της ηλεκτροχημείας σε συνδυασμό με τη χημειοφωταύγεια. Έτσι, αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ CLIA και ECLIA. Επομένως, το CLIA χρησιμοποιεί χημικές αντιδράσεις που οδηγούν στην ανάπτυξη σημάτων χημειοφωταύγειας, ενώ το ECLIA χρησιμοποιεί ηλεκτροχημικές αντιδράσεις που οδηγούν στην ανάπτυξη σημάτων χημειοφωταύγειας.
Το παρακάτω infographic της διαφοράς μεταξύ CLIA και ECLIA δείχνει περισσότερες συγκρίσεις μεταξύ των δύο τεχνικών.
Σύνοψη – CLIA vs ECLIA
Η CLIA και ECLIA είναι και οι δύο τεχνικές που παίζουν σημαντικό ρόλο στη διάγνωση της νόσου. Είναι προηγμένες μέθοδοι ανοσοδιαγνωστικής που βασίζονται στην έννοια της δέσμευσης αντισώματος-αντιγόνου. Η βασική διαφορά μεταξύ CLIA και ECLIA είναι η μέθοδος δημιουργίας χημειοφωταύγειας. Ενώ το CLIA χρησιμοποιεί χημικές αντιδράσεις για τη δημιουργία χημειοφωταύγειας μετά από δέσμευση αντισώματος-αντιγόνου, το ECLIA χρησιμοποιεί ηλεκτροχημικές αντιδράσεις για τη δημιουργία χημειοφωταύγειας. Ωστόσο, και οι δύο τεχνικές είναι γρήγορες και συγκεκριμένες.