Η βασική διαφορά μεταξύ προοδευτικής και παλίνδρομης χρώσης είναι ότι στην προοδευτική χρώση, ο ιστός αφήνεται στο διάλυμα χρώσης για αρκετό χρονικό διάστημα ώστε να φτάσει στο επιθυμητό τελικό σημείο, ενώ στην παλινδρομική χρώση, ο ιστός αφήνεται σκόπιμα για υπερβολική χρώση μέχρι Η χρωστική ουσία διαποτίζει όλα τα στοιχεία του ιστού και στη συνέχεια αποχρωματίζεται.
Η χρώση είναι μια τεχνική που αναδεικνύει και διαφοροποιεί τα συστατικά των ιστών και καθιστά εφικτή την παρατήρησή της στο μικροσκόπιο. Η χρώση Η και Ε είναι η γενική διαδικασία χρώσης ιστού που χρησιμοποιείται πιο συχνά στην ιστολογία. Χρησιμοποιεί αιματοξυλίνη και ηωσίνη (αντίχρηση). Η πυρηνική χρώση με χρήση αιματοξυλίνης μπορεί να επιτευχθεί με τεχνικές προοδευτικής ή παλίνδρομης χρώσης. Ορισμένα σκευάσματα αιματοξυλίνης χρησιμοποιούνται στην προοδευτική χρώση. Η αιματοξυλίνη του Mayer είναι ένα παράδειγμα. Οι προοδευτικές κηλίδες έχουν χαμηλή συγκέντρωση αιματοξυλίνης. Ως εκ τούτου, βάφουν αργά και επιλεκτικά τη χρωματίνη. Μερικά άλλα σκευάσματα χρησιμοποιούνται σε παλινδρομική χρώση. Η αιματοξυλίνη Harris χρησιμοποιείται σε παλίνδρομη χρώση. Οι παλίνδρομες λεκέδες έχουν υψηλή συγκέντρωση αιματοξυλίνης. Ως εκ τούτου, ο λεκές διαχέεται γρήγορα σε ολόκληρο το κύτταρο.
Τι είναι η προοδευτική χρώση;
Η προοδευτική χρώση είναι μια τεχνική που επιτρέπει στον ιστό στο διάλυμα χρώσης να φτάσει στο επιθυμητό τελικό σημείο. Επομένως, απαιτείται συχνή παρακολούθηση της ποιότητας του λεκέ για τον προσδιορισμό της ολοκλήρωσης της χρώσης. Η ένταση της χρώσης ελέγχεται από το χρόνο βύθισης.
Εικόνα 01: Δομή αιματοξυλίνης
Η αιματοξυλίνη του Gill και η αιματοξυλίνη του Mayer είναι προοδευτικής φύσης. Για αυτές τις δύο αιματοξυλιώσεις, χρησιμοποιείται συνήθως χρόνος χρώσης 5-10 λεπτών στην προοδευτική χρώση. Γενικά, οι προοδευτικές αιματοξυλίνες είναι λιγότερο συγκεντρωμένες. Ως εκ τούτου, χρωματίζουν αργά και επιλεκτικά τη χρωματίνη. Στην προοδευτική χρώση, η αιματοξυλίνη χρωματίζει κυρίως τη χρωματίνη στην επιθυμητή ένταση. Έτσι, δεν απαιτείται διαφοροποίηση σε αραιό όξινο οινόπνευμα για να απομακρυνθεί η περίσσεια λεκέ.
Τι είναι η παλίνδρομη χρώση;
Η παλίνδρομη χρώση είναι μια πιο γρήγορη τεχνική χρώσης στην οποία ο ιστός χρωματίζεται σκόπιμα έως ότου η χρωστική ουσία κορεστεί όλα τα συστατικά του ιστού. Στη συνέχεια ο ιστός αποχρωματίζεται επιλεκτικά μέχρι να φτάσει στο σωστό τελικό σημείο. Το βήμα αποχρώσης ονομάζεται διαφοροποίηση. Η διαφοροποίηση γίνεται για να αφαιρεθούν οι υπερβολικοί λεκέδες. Συνήθως, γίνεται χρησιμοποιώντας αραιό όξινο αλκοόλ.
Εικόνα 02: Χρώση Η και Ε
Η αιματοξυλίνη Harris είναι ο ευρέως χρησιμοποιούμενος τύπος αιματοξυλίνης. Οι αιματοξυλίνες Ehrlich και Delafield χρησιμοποιούνται επίσης σε παλίνδρομη χρώση. Οι παλίνδρομες λεκέδες έχουν υψηλή συγκέντρωση αιματοξυλίνης. Ως εκ τούτου, διαχέουν γρήγορα ολόκληρο το κύτταρο και βάφουν τη χρωματίνη και το κυτταρόπλασμα. Η παλινδρομική χρώση προτιμάται όταν απαιτείται πολύ σαφής διαφοροποίηση των στοιχείων του ιστού.
Ποιες είναι οι ομοιότητες μεταξύ της προοδευτικής και της παλίνδρομης χρώσης;
- Η προοδευτική και η παλινδρομική χρώση είναι δύο τύποι τεχνικών χρώσης.
- Και τα δύο χρησιμοποιούν τη βαφή που ονομάζεται αιματοξυλίνη.
Ποια είναι η διαφορά μεταξύ της προοδευτικής και της παλίνδρομης χρώσης;
Η προοδευτική χρώση είναι μια πιο αργή διαδικασία χρώσης κατά την οποία ο ιστός αφήνεται στο διάλυμα χρώσης τόσο πολύ ώστε να φτάσει στο επιθυμητό τελικό σημείο. Αντίθετα, η παλίνδρομη χρώση είναι μια πιο γρήγορη διαδικασία χρώσης κατά την οποία ο ιστός χρωματίζεται σκόπιμα και στη συνέχεια αποχρωματίζεται. Έτσι, αυτή είναι η βασική διαφορά μεταξύ της προοδευτικής και της παλινδρομικής χρώσης.
Επιπλέον, μια άλλη σημαντική διαφορά μεταξύ της προοδευτικής και της παλίνδρομης χρώσης είναι ότι η προοδευτική χρώση δεν απαιτεί ένα πρόσθετο βήμα που ονομάζεται διαφοροποίηση, ενώ η παλίνδρομη χρώση απαιτεί διαφοροποίηση προκειμένου να αφαιρεθούν οι υπερβολικοί λεκέδες. Εξάλλου, οι προοδευτικές κηλίδες έχουν χαμηλή συγκέντρωση αιματοξυλίνων, ενώ οι παλινδρομικές κηλίδες έχουν υψηλότερη συγκέντρωση αιματοξυλίνων.
Το παρακάτω infographic παρουσιάζει περισσότερες διαφορές μεταξύ προοδευτικής και παλινδρομικής χρώσης.
Σύνοψη – Προοδευτική έναντι παλίνδρομης χρώσης
Η προοδευτική χρώση είναι μια τεχνική αργής χρώσης κατά την οποία ο ιστός αφήνεται στο διάλυμα χρώσης αρκετή ώρα ώστε να φτάσει στο τελικό σημείο. Επομένως, η υπερβολική χρώση δεν γίνεται είναι προοδευτική χρώση. Αντίθετα, η παλίνδρομη χρώση είναι μια πιο γρήγορη τεχνική χρώσης στην οποία ο ιστός χρωματίζεται υπερβολικά και στη συνέχεια αποχρωματίζεται. Η προοδευτική χρώση δεν απαιτεί διαφοροποίηση (αφαίρεση περίσσειας λεκέ) ενώ η παλινδρομική χρώση απαιτεί διαφοροποίηση σε αραιή όξινη αλκοόλη προκειμένου να αφαιρεθεί η περίσσεια λεκέ. Οι προοδευτικές κηλίδες έχουν γενικά χαμηλή συγκέντρωση αιματοξυλινών ενώ οι παλινδρομικές λεκέδες έχουν μεγαλύτερη συγκέντρωση αιματοξυλίνων. Έτσι, αυτό συνοψίζει τη διαφορά μεταξύ προοδευτικής και παλίνδρομης χρώσης.
